利用基因工程等生物工程技术，可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子Ⅳ，用于血友病的治疗。请回答下列问题：（1）目的基因的获取方法不是唯一的，若以mRNA为材料-组卷网

非选择题-解答题适中0.65 引用5 组卷533

利用基因工程等生物工程技术，可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子Ⅳ，用于血友病的治疗。请回答下列问题：
（1）目的基因的获取方法不是唯一的，若以mRNA为材料人工合成获得凝血因子Ⅳ基因。其具体方法是___________，构建的基因表达载体应该包括启动子，终止子、____________等。
（2）将含有目的基因的表达载体导入奶山羊受精卵后，需要进行鉴定和检测来确定基因的表达情况。检测奶山羊乳汁中是否含有人凝血因子Ⅳ，可采用__________法。除了分子检测外，有时还需要进行________水平的鉴定。
（3）已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。在DNA连接酶的作用下构建重组质粒，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端_________ （填“能”或“不能”）连接，理由是_____________。
（4）若最终转基因奶山羊乳汁中成功表达出人凝血因子Ⅳ，其中涉及的生物技术有___________________

19-20高三上·河南新乡·阶段练习

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知识点：目的基因的获取基因表达载体的构建目的基因的检测与鉴定答案解析【答案】很抱歉，登录后才可免费查看答案和解析！

“黄金大米”是一种新型转基因大米，其β-胡萝卜素的含量是普通大米的23倍，因大米抛光后呈现黄色而得名。通过转基因技术将胡萝卜素转化酶体系转入到大米胚乳中获得“黄金大米”的培育流程如图所示。请回答下列问题：（已知酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—）

（1）在基因工程中使用的载体除图中质粒外，还有________________等，图中基因Ⅰ、Ⅱ的作用是________________________________________________。
（2）图中涉及的酶Ⅰ或酶Ⅱ主要是从________中分离纯化出来的。据图分析，在构建基因表达载体c的过程中，质粒需用________（限制酶Ⅰ或限制酶Ⅱ）进行切割。
（3）图中通过过程a、b获取目的基因的方法是________法，该方法获得的目的基因________（“含”、“不含”）启动子。若过程d用到了农杆菌转化法，则目的基因插入的c的位置应该是________________。
（4）为检测水稻细胞是否表达出胡萝卜素转化酶，用到的检测方法是________。过程e获得符合要求的个体需要用到的植物激素是________。

绿色荧光蛋白（GFP）能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答下列问题：

（1）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC— 。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后形成黏性末端的过程。_____________________。
②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来_________，理由是___________。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_______。
（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的_______________，其作用是______________________。
（4）科学家们已通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：___________（用序号表示）。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白

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