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非选择题 适中0.65 引用1 组卷47
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。

(1)若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段,其产物长度分别为___________________。若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从隐形纯合子中分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,产物中共有___________种不同长度的DNA片段。
(2)为了提高试验成功率,需要通过_________技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝。该方法也是检测________多样性的最简单方法。
(3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是____________
(4)为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌,首先将大肠杆菌在含___________的培养基上培养,得到如图3的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含__________的培养基上培养,得到如图4的结果(空圈表示与图3对照无菌落的位置)。请在图3中圈出一个含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落。_________

(5)在选出的大肠杆菌内基因D能成功表达的原因是__________________。其表达产物是一条多肽链,如考虑终止密码,则其至少含有的氧原子数为___________
2014·上海黄浦·二模
知识点:遗传信息的翻译DNA重组技术的基本工具目的基因的获取 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.请回答下列问题:

【小题1】若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,其产物长度为_____
若图1中虚线方框内的碱基对被T﹣A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有_____种不同DNA片段.
【小题2】若同时用限制酶MspⅠ、MboⅠ切割图2中的质粒,则可得到_____个DNA片段.
【小题3】若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_____
为了筛选出成功过导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌,一般可进行如下步骤筛选
【小题4】第一步:将大肠杆菌在含_____的培养基上培养,得到如图1的菌落.
第二步:再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含_____的培养基上培养,得到如图2的结果(空圈表示与图1对照无菌落的位置).
第三步:选出图1培养皿中的某些菌落进行培养,即可得到含重组质粒的大肠杆菌.

请在答题纸图1中圈出一个含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落?_____
【小题5】在选出的大肠杆菌内基因D能成功表达的原因是_____.其表达产物是一条多肽链,如考虑终止密码,则其至少含有的O原子数为_____
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:

【小题1】图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次_________________________连接。
【小题2】若用限制酶Sma Ⅰ完全切割图1中DNA片段,其产物长度为_______________________
【小题3】若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sma Ⅰ完全切割,产物中共有_____种不同DNA片段。为了提高实验成功率,需要通过_____________技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝,该方法也是检测_________多样性最简单的方法。
【小题4】若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_____________。在导入重组质粒后,为了筛选出含质粒的大肠杆菌,一般需要用添加____________的培养基进行培养,用影印法接种到只含________________的培养基中培养,可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。
【小题5】假设用BamH Ⅰ切割DNA获取目的基因,用Mbo Ⅰ切割质粒,然后形成重组质粒,若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,能否用BamH Ⅰ?_______。为什么?___

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