非选择题-实验题 适中0.65 引用2 组卷120
酵母菌在缺氧、pH为.4.5-6.0的条件下生长繁殖,而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。某同学用果园土为实验材料,从土壤中分离纯化酵母菌。实验步骤如下:
①土壤取样、制备样品液;
②配制培养基并灭菌、制作平板若干;
培养基A: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖琼脂培养基
培养基B: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖培养液
③用无菌吸管取样品液1ml,注入到有30ml培养基B的锥形瓶中,在30℃、无氧环境中培养24h;
④24h后,用另一支无菌吸管从锥形瓶中取培养液0.lml,分别接种到若干培养基A的平板上,倒置于37℃的恒温箱中培养48小时;
⑤镜检、菌种保藏。
请回答下列问题:
(1)根据实验结果,判断酵母菌的呼吸方式为____ 。
(2)第②步配制的培养基,常采用的灭菌方法是________ 。
(3)第③步实验操作是否具有选择作用,____ ,说明理由________ 。
(4)第④步的接种方法_______ 。
(5)某同学欲测定样品液中酵母茁数量,采用显微镜直接计数方便快捷并且仪器损耗较小。这样得出的结果往往比实际值____ (填“偏高”、“基本不变” “偏低”),理由是____ 。
①土壤取样、制备样品液;
②配制培养基并灭菌、制作平板若干;
培养基A: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖琼脂培养基
培养基B: PH为5.0的乳酸马铃薯葡萄糖培养液
③用无菌吸管取样品液1ml,注入到有30ml培养基B的锥形瓶中,在30℃、无氧环境中培养24h;
④24h后,用另一支无菌吸管从锥形瓶中取培养液0.lml,分别接种到若干培养基A的平板上,倒置于37℃的恒温箱中培养48小时;
⑤镜检、菌种保藏。
请回答下列问题:
(1)根据实验结果,判断酵母菌的呼吸方式为
(2)第②步配制的培养基,常采用的灭菌方法是
(3)第③步实验操作是否具有选择作用,
(4)第④步的接种方法
(5)某同学欲测定样品液中酵母茁数量,采用显微镜直接计数方便快捷并且仪器损耗较小。这样得出的结果往往比实际值
2017·四川绵阳·三模
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牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌,设计了如下实验。
Ⅰ.取样:从刚宰杀的牛的瘤胃中取样,将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。
Ⅱ.培养基的配制和灭菌:
配制全营养LB固体培养基。配方:水、蛋白胨,酵母提取物,NaCl,琼脂糖。(备注:琼脂糖是一种链状多糖,35—40℃时形成半固体状凝胶,90℃以上溶解;琼脂主要成分为琼脂糖和果胶,还有少量含氮化合物等)
配制尿素固体培养基。配方:水、葡萄糖,NaCl,K2HPO4,尿素,酚红,琼脂糖。(备注:酚红是一种酸碱指示剂,在酸性时呈黄色,碱性时呈红色。)
Ⅲ.制备瘤胃稀释液如图并接种。
Ⅳ.在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。
回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/3/779b69bd-5495-4975-bf01-748d575e8456.png?resizew=581)
(1)LB全营养固体培养基和尿素固体培养基都含有的微生物生长所需的4类基本营养物质,它们是____________ 。尿素固体培养基需用琼脂糖做凝固剂而不用琼脂的原因是__________________ 。
(2)尿素培养基中加酚红的原因是以尿素为氮源的微生物培养一段时间后,由于细菌产生的______ 向周围扩散,将培养基中的尿素分解,产生的______ 使培养基中的酚红由黄色变成红色。
(3)该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板(2种平板)先行培养了一段时间,这样做的目的是__________________ 。为了判断尿素培养基是否具有选择作用,实验时还需要同时接种______ 平板。经适当培养,每隔24h统计一次菌落数目。为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h~48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中______ 号试管的稀释倍数比较合适(请从上图中1—5号试管中选择填写)。
(4)接下来,该小组对周围红色区域______ (填“大”或“小”)的菌落进行平板划线法纯化和分离,以便获得单菌落。操作时,接种环通过______ 方法灭菌。在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是____________ 。
Ⅰ.取样:从刚宰杀的牛的瘤胃中取样,将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。
Ⅱ.培养基的配制和灭菌:
配制全营养LB固体培养基。配方:水、蛋白胨,酵母提取物,NaCl,琼脂糖。(备注:琼脂糖是一种链状多糖,35—40℃时形成半固体状凝胶,90℃以上溶解;琼脂主要成分为琼脂糖和果胶,还有少量含氮化合物等)
配制尿素固体培养基。配方:水、葡萄糖,NaCl,K2HPO4,尿素,酚红,琼脂糖。(备注:酚红是一种酸碱指示剂,在酸性时呈黄色,碱性时呈红色。)
Ⅲ.制备瘤胃稀释液如图并接种。
Ⅳ.在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。
回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/3/779b69bd-5495-4975-bf01-748d575e8456.png?resizew=581)
(1)LB全营养固体培养基和尿素固体培养基都含有的微生物生长所需的4类基本营养物质,它们是
(2)尿素培养基中加酚红的原因是以尿素为氮源的微生物培养一段时间后,由于细菌产生的
(3)该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板(2种平板)先行培养了一段时间,这样做的目的是
稀释倍数 | 1×103 | 1×104 | 1×105 | 1×106 | 1×107 |
菌落数 | >500 | 367 | 248 | 36 | 18 |
(4)接下来,该小组对周围红色区域
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