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非选择题-实验题 较难0.4 引用1 组卷384
前列腺癌是发生在前列腺上皮的恶性肿瘤,可分为雄性激素依赖性和雄性激素非依赖性两种类型。请回答下列问题。
(1)研究发现,前列腺癌发生的根本原因是外界致癌因子引起了____,可能还与饮食习惯等因素有关。
(2)为了探究奥曲肽对两种前列腺癌的治疗效果,研究者对体外培养的人前列腺癌DU145和LNCaP细胞采用不同剂量奥曲肽(O、0.1、l、10、100和1000 nmol/L)处理,分别于24 h、48 h、72 h测定并计算细胞增殖抑制率,结果如下图所示。

注:DU145是雄性激素非依赖性前列腺癌细胞;LNCaP是雄性激素依赖性前列腺癌细胞,①在培养过程中,细胞具有____生长的特点,因此传代培养时,通常用___酶处理,使细胞分散。
②由上图结果可知,奥曲肽对于____性前列腺癌的治疗效果可能更好。
(3)为进一步探明奥曲肽的作用机制,研究人员在相同条件下,用1000 nmol/L的该多肽处理DU145细胞,分别于24 h、48 h、72 h提取各组细胞总RNA,再以mRNA为模板__出cDNA,然后用PCR技术扩增相应片段,并对扩增结果进行凝胶电泳,结果如图所示:

注:VEGF是促进血管生成的基因,可刺激肿瘤细胞的生成和增殖;Caspase-3是细胞凋亡过
程中最主要的蛋白酶,基因ß-actin是检测基因表达水平常用的参照基因,表达量不受细胞形态变化或生活条件的影响,转录水平相对稳定,在实验中可作为校准和消除由于检测方法等无关变量对实验结果的影响。
ß-actin的表达产物最可能是 _______(填字母)。
A.血红蛋白       B.细胞骨架蛋白       C.胰岛素
由实验结果可知,奥曲肽抑制了DU145细胞中______,此研究人员推测,奥曲肽治疗前列腺癌的机制可能是_______
2017·北京丰台·一模
知识点:细胞癌变的原因及防治基因指导蛋白质的合成动物细胞培养技术 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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他莫昔芬(Tamoxifen)是治疗乳腺癌的常用药物,然而长期服用容易引起耐药性。牛樟芝(AC)是一种传统的药用蘑菇提取物,科研人员用AC处理Tamoxifen抗性的乳腺癌细胞(MCF-7tamR),发现其可以缓解Tamoxifen的耐药性,相关研究如下,请回答问题:
(1)乳腺癌发生的根本原因是外界致癌因子引起了________突变。
(2)科研人员在不同条件下培养MCF-7tamR细胞,分别于24h、48h测定细胞增长率,结果如图1所示。

①体外培养MCF-7tamR细胞时,培养基中除水、糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子外,通常还需要加入______和抗生素;传代培养时,贴满瓶壁的细胞需要用_____等处理后分瓶继续培养。
②分析图1结果,依据__________,可知AC和Tamoxifen联合使用对于MCF-7tamR细胞的治疗效果最好。
(3)Skp2和RhoA是乳腺癌细胞中两种关键酶,前者抑制细胞凋亡,后者影响细胞代谢。两种酶是基因通过___________过程指导合成的蛋白质。
(4)为进一步探明AC的作用机理,研究人员从100μg/ml AC处理24h的MCF-7tamR细胞中获取mRNA,逆转录得到cDNA后,特异性扩增skp2和RhoA基因的片段,进行电泳检测。结果如图2所示。

①β-actin基因在不同细胞中转录水平相对稳定,且表达量较高,在实验中可消除______等无关变量对实验结果的影响,常用作参照基因。
②由实验结果可知,AC抑制了细胞中Skp2、RhoA基因的_______过程。据此推测AC的作用机制可能是__________
乳腺癌的生长和转移受雌激素调节,持续的雌激素刺激会增加女性患乳腺癌的风险。雌激素受体有多种类型,研究表明其中ERβ具有促进癌细胞凋亡、抑制增殖的作用。为了阐明ERβ抑制癌细胞增殖迁移的机制,研究者进行了系列实验。
(1)雌激素的化学本质是________________,因此能以________________的方式进入细胞,与受体结合后由细胞质转移到细胞核中,调控靶基因的转录。雌激素水平升高时,可以抑制________________激素的分泌,进行反馈调节。
(2)CLDN6是一种细胞间粘附蛋白,推测其在癌细胞中表达量________________(上升/下降)。研究者用ERβ特异性的激动剂DPN处理体外培养的乳腺癌细胞MCF-7,检测CLDN6的表达量,结果如下(图1):
   
研究者用ERβ特异性的激动剂DPN处理,而不用雌激素处理,以排除________________对实验结果的干扰。图中的β-actin属于细胞骨架蛋白,在不同实验处理下表达量恒定,因此可以作为内部参照排除________________的影响。
(3)为探究ERβ能否直接调控CLDN6的表达,研究者采用荧光素酶报告基因法,将CLDN6基因的________________与萤火虫荧光素酶基因连接,构建重组DNA分子,和含有ERβ基因的重组DNA分子一起导入________________(MCF-7/无关细胞),一段时间后加入________________,与对照组相比,实验组出现明显荧光信号。
(4)为了探究CLDN6是否参与ERβ对癌细胞自噬的诱导,研究者用能抑制CLDN6表达的miRNA处理培养的癌细胞,结果如下,请补充实验处理。

实验处理

每个细胞中自噬体的数量

癌细胞的转移数量

DMSO(溶剂)

4

195

DPN

18

130

DPN+miRNA

6

177

________

19

122

(5)综上研究,ERβ发挥抑癌作用的机制是________________,依据该研究,请提供乳腺癌的治疗的思路:________________
咪唑喹啉衍生物(BEZ)和长春花碱(VLB)可用于治疗肾癌,为探究两者对肾癌的治疗效果,科研人员进行了系列实验。请回答问题:

(1)癌细胞具有_____________增殖的特点。体外培养癌细胞时,为了更好地模拟内环境的成分,常需要在培养液中补充______________。将肾癌组织制成细胞悬浮液,置于气体环境为5%CO2+95%空气的恒温培养箱中培养,其中CO2的作用是____________
(2)据图1可知,单独使用BEZ和VLB对癌细胞凋亡____________(填“有”或“无”)明显影响。
(3)Caspase-3是细胞内促凋亡蛋白,Mcl-1是Caspase-3基因表达的调控因子。研究人员对各组细胞进行实验处理24小时后,检测Mcl-1的蛋白质表达含量,结果如上图2。已知GAPDH是一种细胞呼吸酶,在不同细胞中的表达量相对稳定,其作用是作为参照标准,排除_____________对实验结果的影响。据图推测:BEZ+VLB通过_____________,使Caspase-3蛋白含量增加,从而促进肾癌细胞凋亡。
(4)针对肾癌细胞相关的异常分子,可设计和研制特异性的靶点药物,靶向杀伤肾癌细胞。如图3所示为转铁蛋白受体(TfR)与转铁蛋白(Tf)结合,通过____________方式将Fe元素运输至细胞内。肾癌细胞由于增长快速,需要更多的Fe元素,因此肾癌细胞表面TfR表达量___________(填“上升”或“下降”)。目前通过________________技术可获得肾癌细胞靶向抗体分子。

(5)利用上述技术研制出的抗TfR抗体能与TR特异性结合,阻止了____________,抑制____________的摄取,影响了肾癌细胞增长。

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