通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。下图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物 1 和引物2 的5'端分别设计增加限制酶 a 和限制酶 b 的识别位点。下列有关叙述正确的是（       ）

   

A．在该 PCR 反应体系中还需要加入4 种游离核苷酸、解旋酶、耐高温的DNA 聚合酶等

B．第2轮PCR，引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因

C．引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入载体

D．第3轮PCR 结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA分子占1/2