非选择题-实验题 适中0.65 引用1 组卷51
人溶菌酶(HLZ)是一种具有抑菌活性的蛋白质,在食品保鲜、抗菌消炎等方面广泛应用。为提高溶菌酶的产量,研究人员设计了利用基因工程高效生产溶菌酶的方案,流程如图所示。回答下列问题:
(1)溶菌酶能够破坏多种细菌的细胞壁,说明溶菌酶参与人体______ (填“非特异性”或“特异性”)免疫,理由是______ 。
(2)提取出的HLZ基因不具备限制酶切割位点,利用PCR技术对HLZ基因进行扩增时,应在所用两种引物的______ 端添加______ 识别序列,以实现HLZ基因与pPIC9K质粒的正向连接。过程①中将重组质粒导入大肠杆菌的目的是______ 。
(3)过程④中,每隔一段时间取1mL酵母发酵液,离心后取______ (填“上清液”或“沉淀”)进行蛋白质凝胶电泳,得到结果如下图,已知HLZ的理论分子量约为16ku。结果显示本实验中HLZ酵母表达体系初步构建成功,判断依据是______ 。如需进一步确认该蛋白质为HLZ,可采取的措施为______ 。注:M.蛋白Marker;1.空酵母培养48h;2.导入空质粒酵母培养48h;3~6.导入重组质粒酵母分别培养24h、48h、76h、96h。
(1)溶菌酶能够破坏多种细菌的细胞壁,说明溶菌酶参与人体
(2)提取出的HLZ基因不具备限制酶切割位点,利用PCR技术对HLZ基因进行扩增时,应在所用两种引物的
(3)过程④中,每隔一段时间取1mL酵母发酵液,离心后取
2024·湖北·三模
类题推荐
蛋白质谷氨酰胺酶(PG酶)能催化蛋白质发生脱酰胺反应,增大蛋白质的溶解性,提高食品工业中蛋白质的利用率。研究人员从土壤中筛选出产PG酶的金黄杆菌,并设计利用基因工程高效生产PG酶的方案,流程如下图。请据此回答下列问题:(1)在制备细菌的原生质体时,需要利用____ 去除细胞壁;获得原生质体后,可利用____ 促使原生质体融合。(编号选填)
①纤维素酶和果胶酶②溶菌酶③胰蛋白酶④灭活的仙台病毒⑤农杆菌⑥聚乙二醇
(2)图1的过程①应用了PCR技术,以下说法正确的是____(多选)。
(3)完成过程②需要先将PG酶基因与pPIC9K质粒重组,这个过程称为____ 。
(4)图2为相关限制性核酸内切酶的识别和切割位点,根据图1、图2分析,选择用于切割pPIC9K质粒的限制性核酸内切酶是____ 。
(5)在过程⑤中,每隔一段时间取1mL发酵液,离心后取上清液,加入SDS使蛋白质变性(变为线性形状)后,进行蛋白质凝胶电泳(原理同DNA凝胶电泳),得到图3结果。已知PG酶的理论分子质量约为35kDa。请根据图3结果分析本实验中PG酶酵母表达体系是否构建成功?____ 。理由是____ 。
①纤维素酶和果胶酶②溶菌酶③胰蛋白酶④灭活的仙台病毒⑤农杆菌⑥聚乙二醇
(2)图1的过程①应用了PCR技术,以下说法正确的是____(多选)。
A.PCR中引物长度是影响PCR特异性的关键因素之一 |
B.PCR过程中新链的合成方向只能从5'→3' |
C.PCR过程中引物可以重复利用 |
D.退火时引物与单链DNA模板结合 |
(3)完成过程②需要先将PG酶基因与pPIC9K质粒重组,这个过程称为
(4)图2为相关限制性核酸内切酶的识别和切割位点,根据图1、图2分析,选择用于切割pPIC9K质粒的限制性核酸内切酶是
(5)在过程⑤中,每隔一段时间取1mL发酵液,离心后取上清液,加入SDS使蛋白质变性(变为线性形状)后,进行蛋白质凝胶电泳(原理同DNA凝胶电泳),得到图3结果。已知PG酶的理论分子质量约为35kDa。请根据图3结果分析本实验中PG酶酵母表达体系是否构建成功?
蛋白质谷氨酰胺酶(PG酶)能催化蛋白质发生脱酰胺反应,增大蛋白质的溶解性,提高食品工业中蛋白质的利用率。以谷氨酰胺-甘氨酸为唯一氮源,可以筛选土壤中产PG酶的金黄杆菌,流程如图所示。
(1)培养基I中的谷氨酰胺-甘氨酸遇热易分解,灭菌时应选择______。(单选)
(2)结合下图分析不同培养基的类型和目的:培养基II______ ;培养基III______ 。(编号选填)
①固体培养基②半固体培养基③液体培养基④富集培养⑤分离目标微生物 ⑥发酵培养获得目的产物
经检测从土壤中筛选得到的金黄杆菌PG酶产量较低。为获得高产PG酶菌株,研究员以两株野生型PG酶菌株为亲本,用细胞融合技术拟获得PG酶高产融合菌株。
(3)制备细菌的原生质体时,需利用______ 去除细胞壁;获得原生质体后,可利用______ 促使原生质体融合。(编号选填)
①纤维素酶和果胶酶②溶菌酶③胰蛋白酶④灭活的仙台病毒⑤农杆菌⑥聚乙二醇
研究人员还设计了利用基因工程高效生产PG酶的方案,流程如图1:
(4)图1中过程①应用了PCR技术,以下说法正确的是______。(多选)
(5)完成过程②需要先将PG酶基因与pPIC9K质粒重组,这个过程称为______ ;图6为相关限制性内切核酸酶的识别和切割位点,根据图1、图2分析,选择用于切割pPIC9K质粒的限制性内切核酸酶是______ 。
(6)该重组DNA技术的受体细胞是______ (产PG酶的野生菌/大肠杆菌/酵母)。
(7)在过程⑤中,每隔一段时间取1mL发酵液,离心后取上清液,加入SDS使蛋白质变性(变为线性形状)后,进行蛋白质凝胶电泳(原理同DNA凝胶电泳),得到图3结果。已知PG酶的理论分子质量约为35kDa。请根据图3结果分析本实验中PG酶酵母表达体系是否构建成功,并说明理由______ 。
(1)培养基I中的谷氨酰胺-甘氨酸遇热易分解,灭菌时应选择______。(单选)
A.过滤除菌 | B.辐射灭菌 | C.烘箱干燥 | D.高压蒸汽灭菌 |
(2)结合下图分析不同培养基的类型和目的:培养基II
①固体培养基②半固体培养基③液体培养基④富集培养⑤分离目标微生物 ⑥发酵培养获得目的产物
经检测从土壤中筛选得到的金黄杆菌PG酶产量较低。为获得高产PG酶菌株,研究员以两株野生型PG酶菌株为亲本,用细胞融合技术拟获得PG酶高产融合菌株。
(3)制备细菌的原生质体时,需利用
①纤维素酶和果胶酶②溶菌酶③胰蛋白酶④灭活的仙台病毒⑤农杆菌⑥聚乙二醇
研究人员还设计了利用基因工程高效生产PG酶的方案,流程如图1:
(4)图1中过程①应用了PCR技术,以下说法正确的是______。(多选)
A.PCR中引物长度是影响PCR特异性的关键因素之一 |
B.PCR过程中新链的合成方向只能从5’—3’ |
C.PCR过程中引物可以重复利用 |
D.退火时引物与单链DNA模板结合 |
(5)完成过程②需要先将PG酶基因与pPIC9K质粒重组,这个过程称为
(6)该重组DNA技术的受体细胞是
(7)在过程⑤中,每隔一段时间取1mL发酵液,离心后取上清液,加入SDS使蛋白质变性(变为线性形状)后,进行蛋白质凝胶电泳(原理同DNA凝胶电泳),得到图3结果。已知PG酶的理论分子质量约为35kDa。请根据图3结果分析本实验中PG酶酵母表达体系是否构建成功,并说明理由
组卷网是一个信息分享及获取的平台,不能确保所有知识产权权属清晰,如您发现相关试题侵犯您的合法权益,请联系组卷网