单选题-单选 适中0.65 引用4 组卷193
某研究小组从树林中多年落叶形成的腐殖土壤中分离纤维素分解菌并测定其含量，对土样进行稀释的流程如下图所示。摇匀D试管，从D试管中取0.1mL菌液进行接种，在适宜条件下培养一段时间，测得平板中的平均菌落数为34。下列有关说法正确的是（ ）
| A．所用的培养基为选择培养基，成分包含琼脂、水和纤维素 |
| B．每克土样中纤维素分解菌的数量至少是3.4×106个 |
| C．采土工具、接种工具、培养基和培养皿可采用干热灭菌法灭菌 |
| D．还需设置一个未接种的空白培养基同时培养，以检验灭菌是否彻底 |
2024高三下·贵州黔东南·专题练习
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某学习小组从富含纤维素分解菌土壤中获取纤维素分解菌并进行了下列操作：称取土样20 g，加入装有30 mL培养基的摇瓶中并完成稀释，在30 ℃下将摇瓶置于摇床上振荡培养；吸取一定的培养液，转移至另一瓶新鲜的选择培养基中，以同样的方法培养到培养液变浑浊时，吸取0.1 mL培养液进行梯度稀释和涂布平板，以达到分离纯化培养的目的。下列叙述错误的是（ ）
| A．取样土壤须在无菌条件下，用无菌水稀释 |
| B．为检测所用固体培养基是否灭菌严格，应选择未接种的该培养基进行空白培养 |
| C．摇床上振荡培养可以使菌体和营养液充分接触，同时增加液体中的溶氧量 |
| D．可用添加伊红--亚甲蓝的琼脂培养基选择土壤中存在的纤维素分解菌 |
某研究小组从土壤中分离获得能分解纤维素的细菌（A 菌），从 A 菌中提取一种纤维素酶基因（CBHⅡ，长度为1．4kbp）并进行 PCR扩增，然后与高效表达载体 pUT质粒（长度约为 11．7kbp）连接构建成重组质粒并导入 A 菌，从而获得分解纤维素能力更强的工程菌（B菌）。
（1）采集土样时，可以选择树林中多年落叶形成的腐殖土，原因是____ 。采集到的样品加无菌水稀释后__ （填需要或不需要）进行灭菌处理。
（2）CBHⅡ基因两端需添加相关酶切位点才能与图1 所示的 pUT质粒连接，因此扩增CBHⅡ基因时需在两种引物上分别添加__ 序列和_____ 序列。
（3）为了鉴定重组质粒是否构建成功，将重组质粒导入 A 菌，并将其接种在含_____ 的培养基中培养，然后提取 3 个不同菌落的质粒分别进行双酶切验证，将酶切片段和CBHⅡ基因分别进行电泳，结果如图 2 所示。据此分析，菌落______ 中成功导入了重组质粒。
（4）为检测 B菌的纤维素分解能力，将含有 20%的纤维素的培养基分为三组，一组接种B 菌，一组不做处理，一组接种_____ ，在相同条件下培养一段时间，测培养基中纤维素含量，结果如图 3 所示，说明_____ 。
（1）采集土样时，可以选择树林中多年落叶形成的腐殖土，原因是
（2）CBHⅡ基因两端需添加相关酶切位点才能与图1 所示的 pUT质粒连接，因此扩增CBHⅡ基因时需在两种引物上分别添加
限制酶 | 识别序列及酶切位点 |
Bgl II | A↓GATCT |
BstE II | G↓GTAACC |
Sac I | G↓AGCTC |
Msp I | C↓CGG |
BamH I | G↓GATCC |
（3）为了鉴定重组质粒是否构建成功，将重组质粒导入 A 菌，并将其接种在含
（4）为检测 B菌的纤维素分解能力，将含有 20%的纤维素的培养基分为三组，一组接种B 菌，一组不做处理，一组接种
某学习小组从土壤中获取能分解纤维素的纤维素分解菌，并进行了下列操作：称取土样，加入无菌水完成稀释，在适宜温度下将摇瓶置于摇床上振荡培养；再吸取一定的培养液，转移至另一选择培养基中进行选择培养，以同样的方法培养到培养液变浑浊时，进行梯度稀释和涂布平板，以达到分离纯化培养的目的。下列叙述错误的是（ ）
| A．摇床上振荡培养可以使菌体和营养液充分接触，同时增加液体中的溶氧量 |
| B．进行选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能分离到该菌种 |
| C．为检测所用固体培养基是否灭菌严格，应选择未接种的该培养基进行空白培养 |
| D．可用添加酚红指示剂的琼脂培养基鉴别土壤中存在的纤维素分解菌 |
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