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非选择题-解答题 适中0.65 引用1 组卷56
半乳糖血症是单基因遗传病,科学家将正常基因D导入该病患者的细胞,以治疗该病。图甲为A、B、C三种质粒,图乙为含有目的基因D的DNA片段,图丙为重组载体的示意图。Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质,使菌落呈蓝色,EcoRI(0.6Kb)、PvuI(0.8Kb)为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。请回答:

(1)基因工程操作的核心步骤是_________________。图甲中三种质粒适宜作为运载体的是质粒___________,与另外两种质粒相比,其作为载体的优点是__________
(2)为了提高实验成功率,需要通过_________技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝,该技术原理为_____________
(3)获取目的基因D时应选择乙图中的___________对其所在的DNA进行切割。将目的基因D和甲图中相应质粒连接后,得到图丙中三种方式。为选出正向连接的重组质粒,使用___________对质粒完全酶切后,进行电泳分析。若是正向连接载体,电泳图谱中出现长度为_________Kb和5.5 Kb两条带。
23-24高二下·广东东莞·阶段练习
知识点:基因工程的操作程序综合 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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苯丙酮尿症是单基因遗传病,科学家将正常基因D导入该病患者的细胞,以治疗该病。图甲为A、B、C三种质粒,图乙为含有目的基因D的DNA片段,图丙为重组载体的示意图。Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质,使菌落呈蓝色、而非白色,EcoRI(0.6Kb)、PvuI(0.8Kb)为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。回答下列问题:

(1)基因工程操作的核心步骤是___________。图甲中三种质粒适宜作为运载体的是质粒_________,与另外两种质粒相比,其作为载体的优点是___________
(2)获取目的基因D时应选择乙图中的___________对其所在的DNA进行切割。如果仅知道D基因首尾的部分核苷酸序列,根据D基因已知核苷酸序列合成___________,利用PCR扩增目的基因。
(3)将目的基因D和甲图中相应质粒连接后,得到图丙中三种方式。为选出正向连接的重组质粒,使用___________对质粒单酶切后,进行电泳分析。若是正向连接载体,电泳图谱中出现长度为_________Kb和___________Kb两条带。
(4)利用自身不含lacZ基因且对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞,要在已转化的含重组质粒、已转化的含空质粒的受体细胞和未转化成功的细胞中筛选出已转化的含重组质粒的受体细胞的方法是:在含有__________________的培养基上培养,形成_______色菌落的为导入重组质粒的受体细胞。
苯丙酮尿症是单基因遗传病,科学家将正常基因D导入该病患者的细胞,以治疗该病。图甲为A、B、C三种质粒,图乙为含有目的基因D的DNA片段,图丙为重组载体的示意图。Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质,使菌落呈蓝色,EcoRI(0.6Kb)、PvuI(0.8Kb)为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。回答下列问题:

(1)基因工程操作的核心步骤是___________。图甲中三种质粒适宜作为运载体的是质粒_________,与另外两种质粒相比,其作为载体的优点是___________
(2)获取目的基因D时应选择乙图中的___________对其所在的DNA进行切割。如果仅知道D基因首尾的部分核苷酸序列,根据D基因已知核苷酸序列合成___________,利用PCR扩增目的基因。
(3)将目的基因D和甲图中相应质粒连接后,得到图丙中三种方式。为选出正向连接的重组质粒,使用___________对质粒完全酶切后,进行电泳分析。若是正向连接载体,电泳图谱中出现长度为_________Kb和___________Kb两条带。
(4)利用自身不含lacZ基因且对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞,要在已转化的含重组质粒、已转化的含空质粒的受体细胞和未转化成功的细胞中筛选出已转化的含重组质粒的受体细胞的方法是___________

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