单选题-单选 较难0.4 引用3 组卷300
巢式PCR是指先后用外内引物扩增目的基因的方法。其原理为：先以比目的基因大的DNA片段为模板，用外引物（F1，R1）进行扩增，获得大量含目的基因的中间产物，再以扩增后的中间产物为模板，用内引物（F2，R2）扩增目的基因，如图所示。下列说法错误的是（ ）
| A．两对引物的碱基序列不相同，但均应为单链DNA片段 |
| B．第二轮PCR反应能否进行，是对第一轮PCR反应正确性的鉴定 |
| C．由于和两套引物都互补的靶序列较少，该技术可大大提高扩增的特异性 |
| D．如果两套引物一起加入反应体系中，外引物的复性温度应显著低于内引物 |
23-24高二下·四川绵阳·期中
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巢式PCR 是指先后用外内引物扩增目的基因的方法。其原理为：先以比目的基因大的DNA 片段为模板，用外引物(F1，R1) 进行扩增，获得大量含目的基因的中间产物，再以扩增后的中间产物为模板，用内引物(F2，R2) 扩增目的基因，如图所示。下列说法错误的是（ ）
| A．PCR 反应缓冲液中Mg²+的作用是激活 DNA 聚合酶 |
| B．与传统PCR 相比，巢式PCR 能有效提高产物中目的基因的比例 |
| C．由于和两套引物都互补的靶序列较少，该技术可大大提高扩增的特异性 |
| D．如果两套引物一起加入反应体系中，外引物的复性温度应显著低于内引物 |
为减少引物与模板之间的非特异性配对，人们在常规PCR技术的基础上进行了改良，发明了巢式PCR技术。其原理是利用两套PCR引物进行两轮PCR扩增，首先利用第一对引物（外引物）对目的基因所在DNA进行15- 30个循环的扩增；第二轮扩增以第一轮扩增产物为模板，利用第二对引物（内引物或巢式引物）进行15-30个循环扩增，具体过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
| A．巢式PCR中加入的组分与常规PCR相同，但扩增产物比常规PCR特异性更强 |
| B．两套引物需进行两次PCR，由于和两套引物都互补的靶序列较少，因此大大提高了扩增的特异性 |
| C．内引物扩增的模板是外引物扩增后的产物，第二阶段反应能否进行，也是对第一阶段反应正确性的鉴定 |
| D．如果第一次扩增产生了错误片断，则第二次能在错误片段上进行引物配对并扩增的概率将会增加 |
为减少引物与模板之间的非特异性配对，人们对普通PCR技术进行了改良，发明了巢式PCR技术、其原理是利用两套引物进行两轮PCR扩增。首先利用第一对引物（外引物）对目的基因所在的DNA进行第一轮扩增（经过15～30次循环），第二轮扩增以第一轮扩增产物为模板，利用第二对引物（内引物或巢式引物）结合在第一轮扩增产物内部，经过15～30次循环，获得第二轮扩增片段（即目的基因），最终第二轮扩增片段短于第一轮，基本过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
| A．两对引物的碱基序列不相同，但均应为单链DNA片段 |
| B．使用外引物至少经过3次循环，才能得到图示的第一轮扩增产物 |
| C．若第一轮扩增产生错误片段，则其进入第二轮扩增的概率极低 |
| D．普通PCR与巢式PCR相比，特异性更强，错误率更高 |
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