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非选择题-解答题 较难0.4 引用3 组卷135
与普通玉米相比,甜玉米细胞中可溶性糖向淀粉的转化较慢,从而导致可溶性糖含量高,汁多质脆,研究发现这与甜玉米G蛋白含量较高有关。为提高甜玉米的商品价值,科研人员培育出了超量表达G蛋白的转基因甜玉米新品种。在超量表达G基因载体的构建中,所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1、2所示。

(1)图1中强启动子是一段特殊序列的DNA片段,位于基因的_______,驱动基因持续转录,该转录过程中模板链的5'端位于_______(填“M”或“N”)端。
(2)图2所示载体为农杆菌的Ti质粒,当农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的_______转移到被侵染的细胞,并且将其整合到_______
(3)结合图1和图2,为使DNA片段能定向插入Ti质粒中,可用PCR技术在DNA片段的两端添加限制酶识别序列,M、N端添加的序列分别是限制酶______________的识别序列。
(4)外植体经脱分化过程形成的愈伤组织放入农杆菌液(含重组Ti质粒)浸泡后,进行植物组织培养时培养基中需加入_______进行筛选,最终获得玉米植株Y1、Y2、Y3,通过对3个植株的G蛋白表达量和还原糖的含量进行测定,发现Y3植株的G蛋白表达量最多,但却不是还原糖含量最多的植株,原因可能是_______
(5)为了进一步提高甜玉米中淀粉的含量,科研人员提出通过降低淀粉酶合成有关基因的表达实现生产目标。研究人员研究发现吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂,将其注入植物细胞内会使基因表达受阻,科研人员将吗啉反义寡核苷酸导入玉米的受精卵中起到明显效果。针对它的具体作用,科研人员提出以下假说:
假说1:导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪。
假说2:导致RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切。

为了验证上述假说,分别从受精卵发育后3天的实验组和对照组胚细胞中提取_______,逆转录形成cDNA。若假说1成立,使用下图所示引物2和引物4进行PCR后电泳的结果为_______(填字母)。
A. 实验组有目的条带     B. 实验组无目的条带
C. 对照组有目的条带     D. 对照组无目的条带
若要证明假说2成立,需要选择如图所示引物_______进行PCR。
23-24高二下·江苏南京·阶段练习
知识点:PCR扩增的原理与过程基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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与普通玉米相比,甜玉米细胞中可溶性糖向淀粉的转化较慢导致可溶性糖含量高,汁多质脆。为提高甜玉米的商品价值,科研人员培育出了超量表达G蛋白转基因甜玉米新品种。在超量表达G基因载体的构建中,所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1、2所示。

   

(1)强启动子能被_________识别并结合,驱动基因持续转录。在培育转基因甜玉米中T-DNA的作用是_______________。为使DNA片段能定向插入T-DNA中,可用PCR技术在DNA片段的两端添加限制酶识别序列,M、N端添加的序列所对应的限制酶分别是__________________
(2)将玉米体细胞培养成的愈伤组织放入转基因农杆菌液浸泡后,进行植物组织培养获得玉米植株时需要在培养基中加入________________进行筛选,进而获得转G蛋白基因甜玉米株系a1、a2、a3、a4。通过对四个株系的G蛋白表达量进行测定,发现a4株系的表达量与野生型相近,原因可能是____________
(3)图3表示淀粉合成酶基因片段,其转录后形成的前体RNA需通过剪接(切去内含子对应序列)和加工后方能用于翻译。科研人员希望通过降低淀粉合成酶基因的表达,进一步提高甜玉米中可溶性糖的含量,将吗啉反义寡核苷酸(RNA剪接抑制剂)导入玉米受精卵中,发现其基因表达受阻。科研人员对其作用机制提出两种假说:
假说1:导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪切;
假说2:导致RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切。

   

①为验证上述假说,分别在受精卵发育后3天的胚细胞中从实验组和对照组提取______,逆转录形成cDNA。若假说1成立,使用图示引物2和引物4进行PCR后电泳的结果为________(分析各组“目的条带的有无”)。
②若要证明假说2,需要选择图示引物_________进行PCR。
野生型甜玉米与普通玉米相比,可溶性糖向淀粉的转化较慢导致可溶性糖含量高,汁多质脆,富含多种维生素。为提高甜玉米的生产应用价值,科研人员培育出了超量表达G蛋白转基因甜玉米。在超量表达G基因载体的构建中,所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1、2所示。
   
(1)强启动子能被_______识别并结合,驱动基因持续转录。T-DNA在培育转基因甜玉米中的作用是_____。为使DNA片段能定向插入T-DNA中,可用PCR技术在DNA片段的两端添加限制酶识别序列,M、N端添加的序列所对应的限制酶分别是_____。处理好的DNA片段与Ti质粒的重组过程共需要____种酶。
(2)外植体经脱分化形成的愈伤组织放入农杆菌液浸泡后进行植物组织培养,培养基中需加入___进行筛选,获得玉米株系。通过对四个株系的G蛋白表达量进行测定,发现株系的表达量与野生型相近,原因可能是_________
(3)真核基因的编码区含有内含子和外显子。下图为淀粉酶合成基因片段,其转录后形成的前体RNA需通过剪接(切去内含子对应序列)和加工后方能用于翻译。科研人员希望通过降低淀粉酶合成基因的表达,进一步提高甜玉米中可溶性糖的含量,将吗啉反义寡核苷酸(RNA剪接抑制剂)导入玉米受精卵中,发现其基因表达受阻。科研人员对它的具体作用提出两种假说。
假说1:导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪切;
假说2:导致RNA前体上外显子2的对应序列被剪切。
   
①为验证上述假说,分别从受精卵发育后3天的实验组和对照组胚细胞中提取_____,逆转录形成cDNA。若假说1成立,使用图示引物2和引物4进行PCR后电泳的结果为_____(填字母)。
A.实验组有目的条带                    B.实验组无目的条带
C.对照组有目的条带                    D.对照组无目的条带
②若要证明假说2,需选择图示引物_____进行PCR。
与普通玉米相比,甜玉米细胞中可溶性糖向淀粉的转化较慢导致可溶性糖含量高,汁多质脆。为提高甜玉米的商品价值,科研人员培育出了超量表达G蛋白转基因甜玉米新品种。在超量表达G基因载体的构建中,所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1、2所示。

(1)强启动子能被____识别并结合,驱动基因持续转录。在培育转基因甜玉米中T-DNA的作用是____。为使DNA片段能定向插入T-DNA中,可用PCR技术在DNA片段的两端添加限制酶识别序列,M、N端添加的序列所对应的限制酶分别是____。处理好的DNA片段与Ti质粒的重组过程共需要____种酶。
(2)外植体经脱分化形成的愈伤组织放入农杆菌液浸泡后,进行植物组织培养时培养基中需加入____进行筛选,获得玉米株系a1、a2、a3、a4。通过对四个株系的G蛋白表达量进行测定,发现a4株系的表达量与野生型相近,原因可能是____
(3)下图示淀粉合成酶基因片段,其转录后形成的前体RNA需通过剪接(切去内含子对应序列)和加工后方能用于翻译。科研人员希望通过降低淀粉合成酶基因的表达,进一步提高甜玉米中可溶性糖的含量,将吗啉反义寡核苷酸(RNA剪接抑制剂)导入玉米受精卵中,发现其基因表达受阻。科研人员对其作用机制提出两种假说。
假说1:导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪切;
假说2:导致RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切。

①为验证上述假说,分别在受精卵发育后3天的胚细胞中从实验组和对照组提取____,逆转录形成cDNA。若假说1成立,使用图示引物2和引物4进行PCR后电泳的结果为____(目的条带的有无)。
②若要证明假说2,需选择图示引物____进行PCR。
③若某次实验电泳结果发现:实验组和对照组都没有任何条带,从PCR操作过程角度解释可能的原因是____(至少写出两点)。

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