非选择题-解答题 较难0.4 引用1 组卷135
某研究小组计划通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于合成胰岛素。请回答下列问题:
(1)从_____ 细胞中提取mRNA,通过_____ 过程获得cDNA。
(2)PCR反应由变性→复性→_____ 三个基本反应步骤构成,在变性之前需要进行_____ 处理,其目的是增加大分子模板DNA彻底变性的概率。在PCR反应体系中除了加入模板DNA、引物以外,还需要加入_____ (至少写2个)。若引物位于各自模板链的中段,经过4次循环得到_____ 个等长的DNA。
(3)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(图1只标注了部分碱基序列)都不合理,请分别说明理由。第一组:_____ ,第二组:_____ 。_____ (填序号)。
①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物
(5)融合PCR技术采用具有互补末端的引物,形成具有重叠链的PCR产物,通过PCR产物重叠链的延伸,将不同来源的DNA片段连接起来。其原理如图2。_____ (从“需要”“不需要”中选填)完全互补配对。融合PCR的第二步使用的引物是_____ ,若最终获得128个融合基因,则融合PCR第二步消耗了_____ 个引物。
(1)从
(2)PCR反应由变性→复性→
(3)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(图1只标注了部分碱基序列)都不合理,请分别说明理由。第一组:
①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物
(5)融合PCR技术采用具有互补末端的引物,形成具有重叠链的PCR产物,通过PCR产物重叠链的延伸,将不同来源的DNA片段连接起来。其原理如图2。
23-24高二下·江苏南京·期中
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