单选题-单选 较难0.4 引用3 组卷384
dNTP（包括dATP、dTTP、dGTP、dCTP）的结构与ATP类似，除碱基不同外，dNTP含有脱氧核糖。与dNTP相比，ddNTP的五碳糖为双脱氧核糖，其3'碳位为-H且不能与磷酸形成化学键。现有甲~丁四个PCR反应体系，甲体系中含有放射性磷标记的ddATP（记作ddATP+）和DNA模板链。PCR完成后，经电泳（分子量小的DNA在电场中移动快）将甲体系中一组长度不等的DNA单链分离。丙、乙、丁三个PCR体系与甲相似，分别用于检测T、C、G的碱基序列，检测结果如图。下列说法正确的是（ ）
| A．ddATP+中的放射性磷酸基团应位于ddATP的末端 |
| B．甲体系中除含ddATP+外，还应含有dTTP、dGTP、dCTP |
| C．新掺入脱氧核苷酸通过磷酸二酯键连接在子链的5'端 |
| D．模板DNA的碱基序列为3'CTGGACTGACAT5' |
2024·山东淄博·二模
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DNA测序时，先将待测单链DNA模板、引物、有关酶、4种脱氧核苷三磷酸（dNTP，N代表A、T、C、G，能提供能量并作为DNA复制的原料）均加入4个试管中，再分别加入一定量的含放射性同位素标记的ddNTP（ddGTP、ddATP、ddCTP、ddTTP）。不同于dNTP的是，ddNTP的五碳糖的3位不含羟基。在DNA合成时ddNTP随机与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA的延伸，从而形成不同长度的一系列终止处带有放射性同位素标记的DNA链。下图是DNA测序时得到含放射性标记的子代DNA的电泳图谱。下列相关说法错误的是（ ）
| A．反应体系中的引物为单链，DNA聚合酶从引物的3'端连接脱氧核苷酸 |
| B．ddNTP终止子链延伸，其原理可能是其五碳糖的3'位不含羟基，无法连接新的脱氧核苷酸 |
| C．图中加入ddCTP的一组中，可以形成3种长度的子链 |
| D．图中子代DNA的碱基序列是5'-GATCCGAAT-3' |
脱氧核苷三磷酸(dNTP)和双脱氧核苷三磷酸(ddNTP，ddN-Pα~Pβ~Pγ)的结构均与核苷三磷酸(NTP)类似，其中dNTP核糖的第2位碳原子上的羟基(—OH)被氢原子取代而ddNTP核糖第2位和第3位碳原子上的羟基均被氢原子取代。DNA复制时，ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸。现有一些序列为5’—GCCTAAGATCGTA—3’的DNA分子单链片段，拟通过PCR获得被32P标记且以碱基“A”为末端(3’为碱基A)、不同长度的子链DNA。在反应管中加入单链模板、引物、底物、TaqDNA聚合酶、Mg2+及缓冲溶液。下列叙述正确的是（ ）
| A．实验结束后最多可得到3种被32P标记的子链DNA |
| B．反应底物是dCTP、dGTP、dTTP和γ位32P标记的ddATP |
| C．ddNTP与dNTP竞争的延长位点是脱氧核苷酸链的5’末端 |
| D．TaqDNA聚合酶在PCR中的作用是形成氢键和磷酸二酯键 |
脱氧核苷三磷酸（dNTP）3'-C上的-OH被-H替换后转化为双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）。在PCR反应体系中加入待测DNA片段、4种dNTP、1种32P标记的ddNTP和1种引物及其它所需材料，经扩增后获得不同长度的DNA片段混合物。利用每种32P标记的ddNTP分别进行PCR后，将产物点样在变性凝胶上进行电泳分离，通过放射性自显影检测，就可以读出DNA的核苷酸序列。下图为某待测DNA片段的电泳检测结果，下列说法错误的是（ ）
| A．PCR反应体系中的热稳定DNA聚合酶可催化磷酸二酯键的形成 |
| B．连接到核苷酸链上的ddNTP因3'-C上没有-OH而导致DNA延伸中断 |
| C．该DNA片段的待测碱基序列为5'-TTGGCTGCAA-3' |
| D．该PCR过程中待测DNA片段只有1条链作为模板 |
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