单选题-单选 较难0.4 引用4 组卷404
下图示利用重叠延伸PCR技术改造目的基因的原理。相关叙述错误的是( )
A.图示操作中至少需要用2种限制酶对目的基因进行处理 |
B.操作中引物2和引物3序列应含有拟突变位点,且可以互补 |
C.应选用引物1和引物4进行PCR3,以获得大量目的基因序列 |
D.此过程实现的基因序列改变属于基因突变,未发生基因重组 |
2024·北京昌平·二模
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如图是被农杆菌侵染的水稻植株的DNA片段,研究者将其连接成环,并以此环为模板进行PCR,扩增出T—DNA插入位置两侧的未知序列,据此来确定T—DNA插入的具体位置。有关说法正确的是( )
A.农杆菌在自然条件下主要侵染单子叶植物和裸子植物,T—DNA存在于其Ti质粒上 |
B.若扩增循环n次,需要个引物 |
C.利用图中的引物②③组合可扩增出两侧的未知序列 |
D.将扩增出的未知序列与水稻基因组序列比对可确定T—DNA的插入位置 |
实时荧光定量PCR简称qPCR,灵敏度高特异性好,是目前检测微小残留病变的常用方法。将荧光标记的Taqman探针与待测样本DNA混合,当探针完整时,不产生荧光。在PCR过程中,与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解,R与Q分离后,R发出的荧光可被检测到在特定光激发下发出荧光(如图所示),随着循环次数的增加,荧光信号强度增加,通过实时检测荧光信号强度,可得Ct值(该值与待测样本中目的基因的个数呈负相关)。下列相关叙述正确的是( )
A.每个模板DNA分子含有4个游离的磷酸基团 |
B.在反应过程中,需要ATP为新链的合成提供能量 |
C.做qPCR之前,需要先根据目的基因的核苷酸序列合成引物和Taqman探针 |
D.荧光信号达到设定的阈值时,经历的循环数越少,说明含有的病变的概率越小 |
通过引物设计运用PCR技术可以实现目的基因的定点突变如图为基因工程中获取突变基因的过程,其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对,但不影响引物与模板链的整体配对,反应体系中引物1和引物2的5'端分别设计增加限制性内切酶a和限制性内切酶b的识别位点。有关叙述不正确的是( )
A.两种引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因的定向插入 |
B.一个DNA分子在第2轮PCR后,得到的四个DNA分子各不相同 |
C.第2轮PCR,引物1与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因 |
D.在第3轮PCR结束后,含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4 |
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