非选择题-实验题 适中0.65 引用2 组卷86
南方水稻黑条矮缩病是由南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)引起的,是影响水稻生产的重要病害之一。SRBSDV基因组包含10条双链RNA,共编码13个蛋白。基因组中P基因的功能未知。有学者提出,克隆SRBSDV的P基因并转入原核细胞内表达,可为南方水稻黑条矮缩病的诊断及P基因功能的研究奠定基础。请回答下列问题:
(1)提取南方水稻黑条矮缩病病叶中的______ ,经反转录合成cDNA;利用特异性引物进行PCR扩增。扩增时除cDNA、引物外,还需要加入______ 和______ ;为使扩增得到的目的DNA片段能够与载体连接,需要在引物两端添加______ 序列。
(2)将克隆的P基因与质粒连接,构建基因表达载体,此过程中需要用限制酶切割DNA形成黏性末端,再用____________ 将二者连接,形成一个重组质粒,需要连接______ 个磷酸二酯键。
(3)利用电泳技术可将不同相对分子质量的蛋白质分离。若要验证目的基因是否在大肠杆菌细胞中成功表达,则需比较非转基因宿主大肠杆菌、____________ 的大肠杆菌、____________ 的大肠杆菌三者的蛋白质电泳结果差异。
(1)提取南方水稻黑条矮缩病病叶中的
(2)将克隆的P基因与质粒连接,构建基因表达载体,此过程中需要用限制酶切割DNA形成黏性末端,再用
(3)利用电泳技术可将不同相对分子质量的蛋白质分离。若要验证目的基因是否在大肠杆菌细胞中成功表达,则需比较非转基因宿主大肠杆菌、
2024·陕西西安·二模
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