多选题 较难0.4 引用3 组卷180
不对称PCR是利用不等量的一对引物来产生大量单链-限制性引物DNA(ssDNA)的方法。加入的一对引物中含量较少的被称为限制性引物,含量较多的被称为非限制性引物。PCR反应的最初的若干次循环中,其扩增产物主要是双链DNA(dsDNA),但当限制性引物消耗完后,就会产生大量的ssDNA。不对称PCR的简单过程如图所示。假设模板DNA分子初始数量为a个,6次循环后开始扩增产生ssDNA。下列叙述正确的是( )
A.限制性引物和非限制性引物均需要依据模板DNA的碱基序列来设计 |
B.据图可知,最后大量获得的ssDNA与图中甲链的碱基序列相同 |
C.该不对称PCR过程中需要(26-1)a个限制性引物 |
D.上述过程中子链分别沿限制性引物的5'端、非限制性引物的3'端延伸 |
23-24高三下·河北保定·阶段练习
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不对称PCR是利用不等量的一对引物来产生大量单链DNA(ssDNA)的方法,如下图所示。不对称PCR中加入的一对引物中含量较少的被称为限制性引物,含量较多的被称为非限制性引物,两者的比例通常为1:100,PCR反应最初的若干次循环中,其扩增产物主要是双链DNA(dsDNA),但当限制性引物消耗完后,就会产生大量的ssDNA.下列相关说法正确的是( )
A.PCR扩增时双链DNA解聚为单链,需要加入DNA解旋酶 |
B.两种引物与模板链结合,需将温度控制在50℃左右 |
C.扩增时子链分别沿限制性引物的5'端、非限制性引物的3'端延伸 |
D.最后大量获得的ssDNA与图中甲链的碱基序列一致 |
不对称PCR技术是利用不等量的一对引物来产生大量单链DNA(ssDNA)的方法,如图所示。不对称PCR中加入的一对引物中含量较少的被称为限制性引物,含量较多的被称为非限制性引物,两者的比例通常为1/50〜1/100.PCR反应的最初若干次循环中,其扩增产物主要是双链DNA(dsDNA),在限制性引物消耗完后,就会产生大量的ssDNA.下列相关说法正确的是( )
A.两种引物与模板链结合时,需将温度控制在72℃左右 |
B.PCR扩增时,在DNA解旋酶的作用下双链DNA解聚为单链 |
C.通过不对称PCR技术最后大量获得的ssDNA的碱基序列与图中甲链的相同 |
D.PCR扩增时,子链分别沿限制性引物的5′端、非限制性引物的3′端延伸 |
不对称PCR的基本原理是采用不等量的引物,产生大量的单链目标DNA。这两种引物分别称为限制性引物与非限制性引物;其最佳比例一般为1:50~1:100。在PCR反应的早期循环(约20次)中,扩增产物主要是双链DNA,当后期数量较少的限制性引物耗尽后,数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA,过程如图所示。下列相关叙述错误的是( )
A.PCR反应缓冲液中一般需添加Mg2+,以激活DNA聚合酶 |
B.复性时引物与模板链3'端的碱基序列通过互补配对结合 |
C.PCR进行最初20次循环的目的是增加模板DNA的量 |
D.不对称PCR产生的大量单链DNA是由限制性引物延伸而来 |
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