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非选择题-解答题 适中0.65 引用4 组卷257
中性粒细胞是白细胞的一种,具有吞噬病原体的能力。分化过程中涉及到多种转录因子的调控,如P蛋白和M蛋白。研究者以斑马鱼(幼体透明)为材料研究二者的关系。
(1)中性粒细胞既参与免疫的第二道防线,也可作为________发挥摄取、加工、处理和呈递抗原的功能,参与第三道防线。
(2)为了探究P蛋白对M基因的调控作用,研究者用P基因低表达斑马鱼突变体作为实验材料,利用带有标记的核酸分子探针,通过______技术,在发育3天的胚胎中检测M基因的转录情况,结果如图1所示。实验结果表明P蛋白______M基因的表达。

产生以上结果的原因可能有二:
①P基因减少,________
②已知M基因是原癌基因,其产生的蛋白质是_______所必需的,过表达导致细胞过度增殖,引起阳性细胞数量增加。
请从下列选项中选出实验组材料及结果,为上述结论提供新证据_______
A.野生型
B.P基因低表达突变体
C.导入P基因       
D.导入M基因
E.敲低M基因                                               
F.M基因阳性信号及阳性细胞数量增加
G.M基因阳性信号及阳性细胞数量减少
H.M基因阳性信号及阳性细胞数量不变
(3)为进一步探究P基因调控M基因表达的具体方式,研究者对P蛋白与M基因结合位点进行预测,找出10个可能的位点如图2.

研究者将M基因启动子10个位点分成3个部分,构建3种启动子突变质粒,分别与GFP(绿色荧光蛋白)基因相连接:含有①~⑤多位点突变的A、⑥~⑨多位点突变的B以及⑩号位点突变的C.将三种质粒和无突变的质粒D分别注射到野生型和P基因低表达突变体中,结果发现________,说明P蛋白通过结合⑩位点,调控M基因的表达,而与其他位点无关。
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知识点:细胞癌变的原因及防治遗传信息的翻译目的基因的检测与鉴定免疫系统的组成 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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耳是脊椎动物的感官之一,负责感受声音和维持躯体的平衡。研究者利用Tol2(特定DNA片段,可随机插入到染色体基因组任意位点)获得斑马鱼突变体。
(1)研究者用显微注射法将Tol2导入斑马鱼的______中,得到杂合体斑马鱼(F0)。Tol2的随机插入使每一条F0斑马鱼突变位点都不相同。为获得纯合突变体,需将每一条F0______。用上述方法获得的G突变体,只有突变基因纯合时表现为耳石减小、不能保持躯体平衡,说明该插入突变为______性突变。
(2)已报道的M突变体与G突变体性状一样。研究人员为探究M突变体与G突变体是否为同一基因突变导致,进行下图所示实验:

实验结果表明:__________________,且____________
(3)为探究G基因和M基因对内耳发育的调控机制,研究人员进行如下实验。
实验一:将体外合成的斑马鱼M基因的mRNA注射到G突变体中
实验二:将体外合成的斑马鱼G基因的mRNA注射到M突变体中
若实验结果为______,则说明G基因通过调控M基因的表达来调控内耳的发育。
(4)G蛋白是转录因子,能结合在核苷酸序列“——AACCGGTT——”上,启动基因的转录。序列分析发现,M基因启动子含上述结合序列,由此推测____________。为验证这一假说,设计如下方案:
对照组:将野生型M基因的启动子与绿色荧光蛋白(GFP)基因连接,构建基因表达载体,导入野生型斑马鱼,观察绿色荧光蛋白在内耳中的表达情况;
实验组:将______与绿色荧光蛋白(GFP)基因连接,构建基因表达载体,导入野生型斑马鱼,观察绿色荧光蛋白在内耳中的表达情况。
研究表明,肠道菌群失调会导致肥胖、肠炎等的发生,通过移植基因工程改造的肠道菌能有效缓解上述症状。实验过程如下:首先从实验小鼠肠道中提取大肠杆菌,然后将荧光蛋白(GFP)基因与能影响小鼠代谢的胆盐水解酶(BSH)基因连接并导入上述大肠杆菌,使其融合表达,通过饲管将转基因大肠杆菌移植到肠道菌群失调的小鼠肠道中。实验结果显示大部分小鼠的肥胖、肠炎等症状得到缓解。
(1)研究人员利用具有互补末端的引物,使BSH基因与GFP基因的PCR产物形成了重叠链,通过重叠链的延伸,将BSH基因与GFP基因重叠拼接起来形成融合基因。BSH基因与GFP基因的部分碱基序列及融合基因的形成过程如下图所示:

   
①GFP基因的存在有利于检测目的基因是否完成_____。图中引物2和引物3的黑、白区域分别包含10个脱氧核苷酸序列,由图可知引物2的序列为_____(标注5'和3');相比于在引物一端添加特定的限制酶识别序列,这样设计引物的优点是_____,从而有效避免因加入限制酶识别序列可能导致的目的基因表达蛋白功能异常。
②第一步中经过_____次扩增方可得到含有重叠序列的BSH基因与GFP基因,将其经第二步混合、变性后杂交,所获得的_____(填“杂交产物1”或“杂交产物2”)在DNA聚合酶作用下进一步延伸形成BSH和GFP的融合基因,另一种杂交产物不能延伸形成融合基因的原因是_____
(2)实验中发现部分小鼠的症状改善不明显,研究人员推测可能是因为大肠杆菌细胞内的调控蛋白P与BSH基因的启动子结合,影响了BSH基因的表达水平。为验证上述推测,研究人员利用质粒B(含启动子被破坏的金担子素抗性基因)、质粒G(不含金担子素抗性基因)、不能合成尿嘧啶的代谢缺陷型酵母菌等进行如下操作:①将BSH基因的启动子拼接到质粒B中金担子素抗性基因上游构建重组质粒,将重组质粒导入代谢缺陷型酵母菌中,置于不含尿嘧啶、含金担子素的培养基中筛选出成功转化的酵母菌群Y1.由此推测质粒B上应具有的标记基因是_____;②将从大肠杆菌中提取的调控蛋白P基因与质粒G连接后导入代谢缺陷型酵母菌中,置于特定的选择培养基中获得细胞内已表达出调控蛋白P的酵母菌群Y2;③提供条件使Y1与Y2相互靠拢后融合形成接合子;④将接合子均分为两组,一组接种在不含尿嘧啶、不含金担子素的培养基中,观察接合子的生存情况,预期结果是_____;另一组接种在不含尿嘧啶、含金担子素的培养基中,观察接合子的生存情况,预期结果是_____,理由是_____

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