单选题-单选 适中0.65 引用5 组卷533
反向PCR是利用已知序列设计引物对未知序列进行扩增的技术，其过程如下图。下列叙述错误的是（ ）
| A．过程①可用同种限制酶切割磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键 |
| B．过程②需用DNA连接酶将酶切片段环化以实现对未知序列的扩增 |
| C．过程③需添加方向相对的引物1和3以便DNA聚合酶从其3′端延伸子链 |
| D．过程③中将温度调至72℃的目的是使引物与模板链通过碱基互补配对结合 |
2024·山东日照·二模
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反向PCR是一种通过已知序列设计引物对未知序列（图中L、R）进行扩增的技术，其过程如下图所示。下列相关叙述不正确的是（ ）
| A．过程①用同一种限制酶对未知序列两端进行切割 |
| B．过程②需要使用DNA连接酶，形成磷酸二酯键 |
| C．过程③PCR体系需要添加DNA聚合酶和解旋酶 |
| D．该技术可检测T-DNA整合到植物染色体DNA的位置 |
常规PCR只能扩增两引物之间的DNA序列，要扩增已知DNA序列两侧的未知DNA序列，可用反向PCR技术。反向PCR技术扩增的原理如图所示。下列叙述错误的是（ ）
| A．酶切阶段，L中不能含有酶切时所选限制酶的识别序列 |
| B．环化阶段，可选用E．coliDNA连接酶或T4DNA连接酶 |
| C．图中引物，应选择引物1和引物4，且二者间不能互补配对 |
| D．PCR扩增，将温度调至72℃的目的是使引物与模板链结合 |
反向PCR是一种通过已知序列设计引物对未知序列（图中L、R）进行扩增的技术，其过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
| A．过程①一般使用不同的限制酶进行切割 |
| B．过程②需添加两种引物，以便从其5'端连接核苷酸 |
| C．过程③使用的PCR反应缓冲溶液中需要添加Mg2+ |
| D．该过程获得的产物可采用琼脂糖凝胶电泳进行鉴定 |
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