非选择题-解答题 较难0.4 引用1 组卷286
乳糖不耐受是机体乳糖酶分泌少,不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹泻。科学家采用基因工程技术将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中,获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大降低,用到的质粒和目的基因的部分结构如图1和图2所示,不同限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)用Sma Ⅰ切割图1质粒后,______ (填“能”或“不能”)用E.coli DNA连接酶再将其连接起来。在构建基因表达载体时,与用一种限制酶切割相比,用酶切后可以形成不同末端的两种限制酶同时切割目的基因和质粒的优点是________________________ 。
(2)为了将图2中的目的基因准确插入到图1质粒中,需要在肠乳糖酶基因的两端分别添加____________ (填限制酶)的识别序列。为保证肠乳糖酶基因的正确复制和与质粒的正确连接,在设计PCR引物时,应在与链结合的引物的______ (填“3′”或“5′”)端添加____________ (填限制酶)的识别序列。根据图2信息,写出该引物的部分序列:5′-________________________ -3′(写出15个碱基即可)。
(3)在基因表达载体中,肠乳糖酶基因应该位于启动子和______ 之间。将含有肠乳糖酶基因的表达载体导入受体细胞,然后利用胚胎工程培育成个体,采用分子杂交技术检测肠乳糖酶基因在转基因个体中是否转录出mRNA的大致思路为____________________________________ 。
名称 | 识别序列及切割位点 |
Hind Ⅲ | A↓AGCTT |
Sma I | CCC↓GGG |
Kpn I | GGTAC↓C |
Sal I | G↓TCGAC |
Nhe I | G↓CTAGC |
(1)用Sma Ⅰ切割图1质粒后,
(2)为了将图2中的目的基因准确插入到图1质粒中,需要在肠乳糖酶基因的两端分别添加
(3)在基因表达载体中,肠乳糖酶基因应该位于启动子和
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为大量生产人血清白蛋白,科学家将人血清白蛋白基因(HSA基因)导入到动物体内获得动物乳腺生物反应器。回答下列问题:
(1)以mRNA为模板可合成HSA基因,与从基因组文库获取目的基因相比,该方法获得的HSA基因中不包含____ 至少答出2项)序列。
(2)用PCR技术扩增HSA基因时,设计引物的依据是______ 。为使PCR产物能被限制酶切割,需在引物上添加相应的限制酶识别序列。下图为所用载体结构示意图,载体中限制酶的识别序列及切割位点见下表(HSA基因序列中无图中限制酶的识别序列)。
则应在扩增的HSA基因两端分别引入_____________ 两种不同限制酶的识别序列。连接经过这两种酶切割的HSA基因和载体进行时,选用_____________ (填“E.ColiDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”)。
(3)为保证HSA基因成功表达,应将HSA基因与_______ 等调控组件重组在一起。将构建含有HSA基因的表达载体导入_____ 中,利用_________ (答出2项)等胚胎工程的技术手段获得动物乳腺生物反应器。
(4)为获得更多动物乳腺生物反应器,科研人员采用细胞核移植克隆乳腺生物反应器。发现囊胚细胞核移植比体细胞核移植更有优势,其原因是________ 。
(1)以mRNA为模板可合成HSA基因,与从基因组文库获取目的基因相比,该方法获得的HSA基因中不包含
(2)用PCR技术扩增HSA基因时,设计引物的依据是
限制酶 | HindⅢ | EcoRI | PvitⅡ | PstI | KpnI | BamHI |
识别序列及切割位点 | A↓AGCTT TTCGA↑A | G↓AATTC CTTAA↑G | CAG↓CTG GTC↑GAC | CTGC↓AG GA↑CGTC | G↓GTACC CCATG↑G | G↓GATCC CCTAG↑G |
则应在扩增的HSA基因两端分别引入
(3)为保证HSA基因成功表达,应将HSA基因与
(4)为获得更多动物乳腺生物反应器,科研人员采用细胞核移植克隆乳腺生物反应器。发现囊胚细胞核移植比体细胞核移植更有优势,其原因是
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