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非选择题-解答题 较难0.4 引用2 组卷321
某科研人员为增加油菜种子含油量,将酶D基因(图甲左)与叶绿体转运肽基因(图甲右)连接构建融合基因,再把融合基因导入Ti质粒(图乙)形成基因表达载体,将基因表达载体导入农杆菌,应用农杆菌转化法(图丙),最终获得含油量较高的转基因油菜品种。

(1)D基因和转运肽基因构建融合基因需要的限制酶是____。融合基因与Ti质粒构建表达载体需要的限制酶是____
(2)为了获得含有基因表达载体的农杆菌,在农杆菌培养基中需加入____(填“潮霉素”“卡那霉素”或“潮霉素或卡那霉素”)进行筛选,将筛选出的农杆菌浸泡过的油菜愈伤组织,进行植物组织培养,从油菜外植体培养成试管苗需要用____种培养基。
(3)为研究转化过程中酶D基因插入染色体位点情况,研究者筛选出A、B、C 三类转基因植株,成熟后自花传粉、单株收种,将其种子播种于含潮霉素的选择培养基中(图丙),种子萌发率依次为3/4、15/16和63/64,请在下图细胞中画出三类转基因植株酶 D 基因(用D表示)在染色体的位置____

(4)为探究酶 D基因在转化植株中的遗传是否遵循基因自由组合定律,可选择B 类植株与____之间异花传粉,将所结种子播种于含潮霉素的选择培养基中,若萌发率为____,表明酶 D基因在转化植株中遵循基因自由组合定律。
23-24高三下·重庆九龙坡·阶段练习
知识点:基因分离定律的实质和应用基因自由组合定律的实质和应用基因表达载体的构建目的基因的检测与鉴定 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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fat1基因和fat2 基因控制的酶分别调控两种多不饱和脂肪酸的合成,两种酶的共同表达对于细胞内多不饱和脂肪酸的合成具有协同效应。2A肽是一种来源于病毒的短肽,受2A基因序列控制。2A基因的转录产物可以通过“核糖体跳跃”断开位于2A肽尾端甘氨酸和脯氨酸之间的肽键,将2A基因编码的蛋白分割成2个独立蛋白。图甲表示科研人员利用重叠延伸PCR 技术成功构建融合基因fat1—2A——fat2的过程。图乙表示构建成功的包含融合基因的重组质粒的部分片段,F1至F4、R1至R4表示引物。通过基因工程成功实现了 fat1基因和fat2基因在大肠杆菌细胞内的共同表达。

(1)利用PCR 技术可以实现在体外快速大量进行DNA扩增,其需要的物质条件为:DNA 模板、4种脱氧核苷酸、____________________
(2)PCR3不需要引物,高温加热后fat1——2A和2A——fat2的双链解开,其中能正常延伸形成融合基因的是_________(填序号)形成的杂交链。
(3)图乙所示基因在转录时应以______链为模板,为了确定 fat1基因连接到质粒中且插入2A序列的上游,需进行PCR 检测,若仅用一对引物,应选择图乙中的引物_______
为增加某油料作物种子中多不饱和脂肪酸含量,研究人员将该融合基因(命名为D)转入Ti质粒(图丙)形成基因表达载体,将基因表达载体导入农杆菌,应用农杆菌转化法(图丁),最终获得多不饱和脂肪酸含量较高的转基因作物品种。

图丙

图丁

(4)Ti 质粒部分片段如图丙所示,为使融合基因D成功与Ti 质粒构建表达载体,PCR 时需要在图乙引物____的5’端添加限制酶__________的识别位点,并在引物____的5’端添加限制酶________的识别位点。
(5)为了获得含有基因表达载体的农杆菌,从功能角度来说,需使用含有抗生素的______培养基进行筛选,将筛选出的农杆菌浸泡过的作物愈伤组织,进行植物组织培养,从外植体培养成试管苗需要用______种培养基。
(6)为研究转化过程中酶D基因插入染色体位点情况,研究者筛选出转基因植株,成熟后自花传粉、单株收种,将其种子播种于含潮霉素的选择培养基中(图丁),若种子萌发率为15/16,请在下图细胞中画出转基因植株酶 D 基因(用D表示)在染色体的位置。____

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