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非选择题-解答题 较难0.4 引用1 组卷115
现有从不同植物体获取的抗寒基因——COR基因(图2)和该基因的超强启动子(图1)。某生物课题小组欲利用图3质粒构建超强表达载体并转入农杆菌,然后侵染番茄愈伤组织细胞,进而培育耐低温番茄植株。回答下列问题:

(1)要将启动子与目的基因正确连接,在扩增启动子时,需要在引物1和引物2的5'端添加的序列对应的限制酶分别是____
(2)启动子与目的基因连接后,插入质粒时应先用____切割质粒,然后对限制酶进行灭活再与添加了启动子的目的基因连接,目的是____
(3)为了筛选出含有重组表达载体的受体细胞,需要先后在添加了____的培养基上培养受体细胞。
(4)导入重组表达载体的番茄愈伤组织细胞,需要经过____技术培育成个体,然后对其进行____水平和____水平的鉴定。
(5)培养转基因植物时,为了避免外源基因通过花粉传播进入其他植物导致基因污染,可采取的措施是:____
22-23高三下·广西钦州·阶段练习
知识点:PCR扩增的原理与过程基因表达载体的构建目的基因的检测与鉴定植物组织培养技术综合 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下列问题:

(1)在该过程中,研究人员首先获取了抗盐基因(目的基因),并采用____________技术对目的基因进行扩增,该技术扩增目的基因的前提是_________________________,以便根据这一序列合成引物,同时该技术必须用_____________酶。如果目的基因进行扩增,循环4次,理论上至少需要加入______个引物。
(2)基因工程的核心步骤是______(填序号),该步骤的目的是使目的基因在受体细胞中___________ ,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够__________ 。在该过程中,可用一种或多种限制酶进行切割,为了避免目的基因和载体在酶切后发生任意连接,在此实验中应该选用_________________分别对含目的基因的DNA片段和质粒进行切割。同时为了使目的基因正常表达,其首端必须有启动子,它是__________识别和结合的部位。
(3)图中将抗盐基因(目的基因)导入烟草细胞的方法一般为_______________。该方法用到的Ti质粒中含有_________________,可以将目的基因转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体上。
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,要进行分子杂交。若要检测番茄的DNA上是否插入抗盐基因,应以____________________为探针,与番茄基因组DNA杂交;要确认抗盐基因是否在转基因番茄植株中正确表达,应通过_____________法检测。

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