非选择题-解答题 适中0.65 引用2 组卷177
二十碳五烯酸(EPA)能促进体内饱和脂肪酸代谢,具有降低血液黏稠度、预防心脑血管疾病的功效。研究人员利用转基因技术从海洋生物中提取了EPA合成途径的关键基因pfaB,并将其导入酵母菌内,通过酵母菌发酵生产EPA。图1和图2分别是转基因过程中使用的含目的基因的DNA片段和质粒。回答下列问题:___ (答出三点)等结构才行。若要将pfaB基因导入植物细胞,可采用___ (填一种)法。
(2)据图可知,为了使目的基因和质粒定向连接,构建重组质粒时应选择限制酶___ 对基因pfaB和质粒进行切割。用PCR技术对基因pfaB进行扩增时,要向仪器中加入足量的引物___ (填图1中数字),以保证扩增的正常进行。PCR缓冲液中要添加适量的Mg2+,其目的是___ 。PCR结束后可采用琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行鉴定,一定pH下,在电场中,DNA分子会向着___ 的电极移动,DNA分子在凝胶中的迁移速率与___ (填两种)等因素有关。
(3)有人认为将基因pfaB导入大肠杆菌细胞中,无法得到具有相应生理功能的表达产物,其理由是___ 。
(2)据图可知,为了使目的基因和质粒定向连接,构建重组质粒时应选择限制酶
(3)有人认为将基因pfaB导入大肠杆菌细胞中,无法得到具有相应生理功能的表达产物,其理由是
2024·云南楚雄·二模
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研究表明EPA(二十碳五烯酸)能促进体内饱和脂肪酸代谢,具有降低血液黏稠度、预防心脑血管疾病的功效。研究人员利用转基因技术从海洋生物中提取了EPA合成途径的关键基因pfaB,并采用合理且表达效率最高的方案构建基因表达载体,将其导入酵母菌内,通过酵母菌发酵生产EPA。下图1表示目的基因(pfaB基因)及其上的限制酶酶切位点,图2表示质粒的结构示意图。请回答下列问题:
(1)根据图1分析,利用PCR扩增pfaB基因时所选用的引物是________ ,理由是________ 。
(2)根据图1和图2分析,构建表达效率最高的基因表达载体时,应选择________ 酶分别切割含目的基因的DNA和质粒,目的是________ 。
(3)目的基因的检测时,采用PCR等技术可检测________ 。(答出2点)
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EcoR I | Hind III | BamHI | Sma I |
5’-G↓AATTC-3’ 3’-CTTAA↑G-5’ | 5’-A↓AGCTT-3’ 3’-TTCGA↑A-5’ | 5’-G↓GATCC-3’ 3’-CCTAG↑G-5’ | 5’-CCC↓GGG-3’ 3’-CCC↑GGG-5’ |
(2)根据图1和图2分析,构建表达效率最高的基因表达载体时,应选择
(3)目的基因的检测时,采用PCR等技术可检测
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