非选择题-解答题 较难0.4 引用1 组卷112
近年来,卒中、脑梗、心梗等心脑血管病患病率持续上升。2023年11月国家卫健委发布《心脑血管疾病防治行动实施方案》推进对患者的救治和防病工作。
(1)卒中、脑梗、心梗等心脑血管病多是因动脉粥样硬化、血栓引起组织缺血所致。血栓由纤维蛋白构成,组织型纤溶酶原激活剂(t-PA) 由527个氨基酸构成(如下图), t-PA 进入血浆后激活纤溶酶原, 使之转化成纤溶酶, 酶将沉积在血管内壁的纤维蛋白分解血栓裂解, 血管畅通。t-PA进入血浆后多与纤溶酶原激活剂抑制物形成复合物,很快失去活性,所以溶栓时要持续输入t-PA。然而, 大剂量t-PA易诱发出血。鉴于此, 有人提出通过抑制__________ 的活性, 以延长t-PA的活性。进一步研究显示,t-PA第84位的半胱氨酸替换为丝氨酸后的t-PA溶血栓更快, 这种改造的t-PA副作用更小。用生物化学手段直接改造“t-PA”蛋白质的结构,或是定点改造 t-PA 基因成为“突变基因”,通过基因工程等生物工程技术获取“突变的t-PA”。通过后者改造“t-PA”的主要优势是__________ (写出一点)。
(2)已知t-PA基因碱基序列、丝氨酸密码子,可以通过人工合成目的基因(t-PA 突变基因) 、基因与质粒重组构建表达载体、表达载体进入受体细胞等一系列操作,最终获取“突变的t-PA”。这种基于t-PA的分子结构和功能的关系,通过一系列DNA 分子层面的操作获取人类所需蛋白产品的第二代基因工程过程又叫做__________ 。
(3)从上述人t-PA 基因获得第84位半胱氨酸替换为丝氨酸编码序列的t-PA突变基因,常借助PCR体外定点定向诱变获得。工作原理如图: 先合成包含突变碱基的两个突变引物。因突变点不位于基因端点,要借助 PCR 获得完整的t-PA 突变基因,还要合成两个正常引物1、2.参考图中正常引物1(5'-TACCAAGTGATCTGCAGA-3')、t-PA 基因和 PCR 诱变过程原理图, 正常引物2 是5’___________ ……-3’(写出5’端的6个碱基即可)
(4)为了与质粒高效连接,t-PA突变基因两端应携带相应的限制酶识别序列。应将限制酶识别序列设计在两条正常引物的__________ 端。限制酶能够使 DNA 分子中特定部位的__________ 键断开。
(1)卒中、脑梗、心梗等心脑血管病多是因动脉粥样硬化、血栓引起组织缺血所致。血栓由纤维蛋白构成,组织型纤溶酶原激活剂(t-PA) 由527个氨基酸构成(如下图), t-PA 进入血浆后激活纤溶酶原, 使之转化成纤溶酶, 酶将沉积在血管内壁的纤维蛋白分解血栓裂解, 血管畅通。t-PA进入血浆后多与纤溶酶原激活剂抑制物形成复合物,很快失去活性,所以溶栓时要持续输入t-PA。然而, 大剂量t-PA易诱发出血。鉴于此, 有人提出通过抑制
(2)已知t-PA基因碱基序列、丝氨酸密码子,可以通过人工合成目的基因(t-PA 突变基因) 、基因与质粒重组构建表达载体、表达载体进入受体细胞等一系列操作,最终获取“突变的t-PA”。这种基于t-PA的分子结构和功能的关系,通过一系列DNA 分子层面的操作获取人类所需蛋白产品的第二代基因工程过程又叫做
(3)从上述人t-PA 基因获得第84位半胱氨酸替换为丝氨酸编码序列的t-PA突变基因,常借助PCR体外定点定向诱变获得。工作原理如图: 先合成包含突变碱基的两个突变引物。因突变点不位于基因端点,要借助 PCR 获得完整的t-PA 突变基因,还要合成两个正常引物1、2.参考图中正常引物1(5'-TACCAAGTGATCTGCAGA-3')、t-PA 基因和 PCR 诱变过程原理图, 正常引物2 是5’
(4)为了与质粒高效连接,t-PA突变基因两端应携带相应的限制酶识别序列。应将限制酶识别序列设计在两条正常引物的
2024·广西·二模
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(1)对Cry蛋白改造描述正确的是____。
(2)如果将第168、第282、第283位的氨基酸全部替换,Cry蛋白对舞毒蛾的毒性____。
(3)下列关于蛋白质工程的叙述错误的是____。
人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓。但为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血,其原因在于t-PA与纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实,将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。据此,先对天然的t-PA基因进行序列改造,然后再采取传统的基因工程方法表达该突变基因,可制造出性能优异的t-PA突变蛋白。据题和图示回答:
(4)已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的编码链序列为5’-TGT-3’,而丝氨酸的密码子为UCU,因此与编码链互补的突变引物中相应序列应设计为____________ 。
(5)若获得的t-PA突变基因如图所示,那么质粒pCLY11需用限制酶___________ 切开,才能与t-PA突变基因高效连接,在连接时需要用到________ 酶。
(6)应选择在加入新霉素的培养基中_____ (能/不能)生存并形成菌落的大肠杆菌作为受体细胞,将目的基因导入受体细胞,放在含新霉素的培养基中培养,选择呈______ 色的菌落,进一步培养、检测和鉴定,以选育能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。
(1)对Cry蛋白改造描述正确的是____。
A.直接改造Cry蛋白 |
B.直接改造Cry蛋白的mRNA |
C.改造编码Cry蛋白的基因 |
D.重新合成新的基因 |
A.增加7倍 |
B.增加3倍 |
C.增加21倍 |
D.不确定,需要重新检测 |
A.蛋白质工程本质是对蛋白质分子结构进行改造,但被改造的蛋白质分子还是无法遗传 |
B.蛋白质工程与DNA分子重组技术是分不开的,要用到限制酶和DNA连接酶 |
C.蛋白质工程根据蛋白质结构,创造新基因或者改造老基因 |
D.蛋白质工程可按照人的意愿生产出自然界中不存在的蛋白质 |
人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓。但为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血,其原因在于t-PA与纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实,将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。据此,先对天然的t-PA基因进行序列改造,然后再采取传统的基因工程方法表达该突变基因,可制造出性能优异的t-PA突变蛋白。据题和图示回答:
(4)已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的编码链序列为5’-TGT-3’,而丝氨酸的密码子为UCU,因此与编码链互补的突变引物中相应序列应设计为
(5)若获得的t-PA突变基因如图所示,那么质粒pCLY11需用限制酶
(6)应选择在加入新霉素的培养基中
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