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非选择题-解答题 较难0.4 引用1 组卷69
CRM1是一种核转运蛋白,由CRM1基因控制产生,转运含有NES序列的货物蛋白。科学研究发现,肿瘤细胞中CRM1基因过度表达,含有NES序列的肿瘤抑制因子被过量地转运至细胞质,使得它们无法在细胞核内发挥正常功能,会促进肿瘤的发生及生长。为探究CRM1的运输机制及肿瘤的治疗,科学家进行了相关研究。请回答下列问题:
(1)研究人员利用PCR技术大量扩增CRM1基因,需要根据______设计两种引物,引物的作用是_______
(2)CRM1C528S是CRM1突变体,不具有运输能力,GST-NES为某种肿瘤抑制因子,RanGTP蛋白可能与货物蛋白的转运有关,研究人员利用上述物质设计实验进行跨膜模拟,结果发现只有③组实现了对GST-NES的跨膜转运,据此可推断________
   
(3)科学家利用计算机成功筛选出了与货物蛋白结构相似的小分子KPT,并将其制备成抑制肿瘤细胞药物,推测KPT的作用机理是________。请设计实验验证上述推论,写出实验思路和预期结果。(材料:肿瘤小鼠模型若干只、正常小鼠模型若干只、小分子KPT。注:药物处理方法与肿瘤的具体检测方法不做要求)实验思路:__________。预期结果:__________
23-24高三下·河北沧州·阶段练习
知识点:细胞癌变的原因及防治PCR扩增的原理与过程验证性实验与探究性实验 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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研究发现,MZF1-AS1是一种长链非编码RNA,可以和核蛋白PARP1结合参与基因的调控,从而促进肿瘤细胞的增殖。科研人员通过PCR技术得到PARP1基因全长序列(图1),其编码的蛋白质含1014个氨基酸,三个功能区(图2),图中数字代表氨基酸对应的位置;构建含GST标签的重组载体以获得不同长度的融合蛋白。

(1)欲PCR扩增PARP1基因的编码区,需设计一对引物F1和R1,在图1中选出两引物与模板结合的位置_____(填图中序号),PCR反应体系中需要加_____酶,PCR产物一般通过_____法鉴定。
(2)为了得到GST-PARP1融合蛋白,需构建不同长度的带有GST标签序列的PARP1基因表达载体,GST序列尾端不能含有_____序列(不考虑移码突变);纯化得到6种融合蛋白,分别与体外转录得到的生物素标记的MZF1-AS1进行体外结合实验,形成RNA—蛋白质复合物,该复合物可通过一定技术分离出来,将分离纯化获得的结合在复合物上的RNA,经RT-PCR后鉴定结果如图3所示,据图可知_____

(3)研究发现,MZF1-AS1能促进转录因子E2F1与靶基因启动子结合,从而促进肿瘤细胞的增殖,MZF1-AS1和E2F1无直接相互作用,PARP1和E2F1有相互作用;将PARP1载体和E2F1载体共同转染5组细胞,细胞内E2F1含量相同。1、4组不做处理,2、5组MZF1-AS1基因过量表达,3组MZF1-AS1基因敲除处理。将5组细胞裂解,在4、5组细胞裂解液加入RNA酶,处理一段时间,然后分别在5组细胞裂解液中加入PARP1抗体得到沉淀,再分别利用E2F1抗体对上述沉淀中图4的蛋白质进行检测,结果如图所示,据图可知_____

(4)综上所述,MZF1-AS1对肿瘤细胞的作用机理是_____

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