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非选择题-实验题 较难0.4 引用3 组卷618
CAR-T细胞疗法是通过设计CAR基因,并导入癌症患者的T细胞中,使其转化为CAR-T细胞,杀死特定肿瘤细胞的一种疗法。
(1)CAR-T细胞通过____肿瘤细胞的抗原,从而清除肿瘤细胞。CAR-T疗法体现了免疫系统的____功能。
(2)多发性骨髓瘤(MM)是一种以浆细胞异常增殖为特征的恶性肿瘤,B细胞成熟抗原(BCMA)选择性表达于包括MM肿瘤细胞在内的浆细胞表面,在人体主要器官的细胞上基本不表达。科研人员从健康志愿者外周血中分离出T细胞,均分为两组,实验组T细胞进行转化,构建新型针对BCMA的CAR-T细胞,对照组T细胞不做处理。选人骨髓瘤B细胞为靶细胞,进行CAR-T细胞杀伤实验,结果如表:两组细胞在不同效靶比时对靶细胞的杀伤效率比较(注:效靶比指的是T细胞与靶细胞的浓度比值)。

组别

效靶比

靶细胞凋亡率(%)

实验组

1:4

16.67

1:1

41.90

4:1

65.05

对照组

1:4

2.53

1:1

6.50

4:1

17.21

①根据以上结果,说明已经成功构建出靶向BCMA的CAR-T细胞,理由是____
②T细胞与肿瘤细胞发生反应的另一个关键特征是促炎症细胞因子(IFN-γ)的释放,让CAR-T细胞杀伤相同数量的靶细胞后检测IFN-γ的含量,若____,则进一步表明已经成功构建出相应的CAR-T细胞。
(3)CAR-T细胞无法进入肿瘤组织内部,对实体瘤治疗效果不佳。实体瘤组织的核心区缺氧,某种厌氧型细菌可定植在肿瘤的核心区。研究人员对该细菌进行改造获得工程菌,用于提高CAR-T的靶向性。

   

①由图1可知,工程菌定植在肿瘤的核心区并释放靶标分子,该分子可以____,将CAR-T细胞招募到肿瘤周围,使其发挥免疫功能。
②绿色荧光和红色荧光叠加时显示为黄色荧光。科研人员用红色荧光蛋白标记CAR-T细胞,再将其与肿瘤细胞、靶标分子共同培养,在显微镜下检测荧光分布情况。结果显示____,说明靶标分子发挥功能。
③为进一步验证工程菌能否提高CAR-T的靶向性,研究人员向图2所示小鼠静脉注射CAR-T细胞,并在左侧肿瘤内单次注射工程菌。两周后发现双侧肿瘤生长均受到抑制,但左侧肿瘤的治疗效果更明显。请结合上述原理进行解释____
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知识点:细胞免疫验证性实验与探究性实验免疫系统的功能 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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CAR-T细胞疗法是通过设计CAR基因,并导入癌症患者的T细胞中,使其转化为CAR-T细胞,杀死特定肿瘤细胞的一种疗法。多发性骨髓瘤(MM)是一种以浆细胞异常增殖为特征的恶性肿瘤,B细胞成熟抗原(BCMA)是一种选择性表达于包括MM肿瘤细胞在内的浆细胞表面,在人体主要器官的细胞上基本不表达。研究人员构建新型针对BCMA的CAR-T细胞,并观察其对MM肿瘤细胞的杀伤作用。请回答:
(1)人体内B细胞成熟的场所是_____________,当B细胞接受抗原与____________细胞表面的特定分子的刺激而活化,增殖分化为浆细胞和____________细胞。
(2)CAR分子主要包括三个部分:胞外域、跨膜域和胞内域(如图)。

①抗体的功能区由VH肽链和VL肽链组成。制备治疗MM的CAR-T细胞的CAR分子胞外域作用是与____________特异性结合。
②跨膜域主要功能为将CAR分子锚定在细胞膜上。胞内域包括共刺激结构域和信号传导结构域,当信号由胞外传导至胞内时,使T细胞的完全活化,促使T细胞_____________
(3)科研人员从健康志愿者外周血中分离出T细胞,均分为两组,实验组T细胞进行转化,对照组T细胞不做处理。选人骨髓瘤B细胞为靶细胞,进行CAR-T细胞杀伤实验,结果如表:
两组细胞在不同效靶比时对靶细胞的杀伤效率比较

组别

效靶比

靶细胞凋亡率(%)

实验组

1:4

16.67

1:1

41.90

4:1

65.05

对照组

1:4

2.53

1:1

6.50

4:1

17.21

(注:效靶比指的是T细胞与靶细胞的浓度比值)
①根据以上结果,说明已经成功构建出靶向BCMA的CAR-T细胞,理由是___________
②T细胞与肿瘤细胞发生反应的另一个关键特征是促炎症细胞因子(IFN-γ)的释放,让CAR-T细胞杀伤相同数量的靶细胞后检测IFN-γ的含量,若_____________,则表明已经成功构建出相应的CAR-T细胞。
为实现对肝癌的有效治疗,研究人员通过比较肝肿瘤细胞和正常细胞间差异,筛选有效的免疫治疗靶点,制备相应单克隆抗体并构建抗体——药物偶联物。
(1)检测发现细胞的CLDN6蛋白能够促进肿瘤发生,选定其作为单克隆抗体的作用靶点。CLDN6蛋白是一个跨膜蛋白,包括胞外区、跨膜区和胞内区,制备免疫小鼠所用的抗原时,应提取_________区基因序列用于设计抗原。
(2)将CLDN6蛋白抗原注射到小鼠体内,从该小鼠脾脏中获取________________细胞,利用________________诱导此细胞与骨髓瘤细胞融合,经筛选得到杂交瘤细胞,通过克隆化培养和抗体阳性检测,多次筛选得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞,最终可通过体内或体外培养获得大量单克隆抗体。
(3)将该单克隆抗体与抗癌药物DM1结合构建抗体——药物偶联物CLDN6-DM1。用不同浓度的游离DM1、CLDN6-DM1或lgG-DM1(无关抗体-DM1)分别处理高表达CLDN6细胞和低表达CLDN6细胞,检测细胞活力,结果如图。

①由图可知,CLDN6-DM1能特异性杀伤高表达CLDN6细胞,依据是________________
②研究发现,DM1是一种小分子物质,能够抑制纺锤体微管的形成,由此分析DM1能够进入细胞中通过抑制细胞的_________________过程起到抗癌的作用。
(4)下图表示抗体-药物偶联物CLDN6-DM1的作用机制。

由图分析,CLDN6-DM1能特异性杀伤高表达CLDN6细胞的原因是________________
若用红色荧光标记的CLDN6-DM1和lgG-DM1处理肝肿瘤细胞来证明上述机制,则应观察到的现象是用红色荧光标记的CLDN6DM1处理肝肿瘤细胞可在细胞中及溶酶体中检测到红色荧光,而用IgG-DM1处理则不能检测到

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