近年来，生物柴油作为新型能源已经成为世界上应用最广泛、发展迅猛的可再生能源之一。研究人员利用基因工程的方法将油料作物紫苏DGATI基因导入四尾栅藻（操作过程如图-组卷网

非选择题-解答题适中0.65 引用1 组卷120

近年来，生物柴油作为新型能源已经成为世界上应用最广泛、发展迅猛的可再生能源之一。研究人员利用基因工程的方法将油料作物紫苏DGATI基因导入四尾栅藻（操作过程如图），获得转基因的产油微藻并利用地热废水培养，不仅能生产生物柴油，还能治理地热废水。

限制酶及其识别序列

限制酶	识别序列
BamH I
Hind III
EcoR I
Xba I

注：LacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色。若无该基因或该基因被破坏，则菌落则呈白色。
(1)提取紫苏细胞的总RNA经过____得到的cDNA，经____技术扩增得到DGAT1基因，与克隆质粒pMD19连接，将连接产物导入到经CaC1₂处理后的大肠杆菌细胞，并接种到添加____的培养基上培养，一段时间后，挑选颜色为____的菌落用液体培养基培养，提取质粒pMD19-DGAT1。
(2)用限制酶切pMD19-DGAT1获得DGAT1基因，并与酶切后的载体pBI121连接得到____，并导入到四尾栅藻。若DGAT1基因序列两端没有限制酶识别序列需要人工添加黏性末端，请根据表中信息写出DGAT1基因两端所添加脱氧核苷酸的碱基顺序____，使得目的基因左右侧分别与质粒上的BamH I、Xba I酶切末端相连。
(3)转DGATI基因四尾栅藻成功的标志是_____。

23-24高三下·福建泉州·阶段练习

收藏试题下载试题加入试题篮

知识点：基因表达载体的构建目的基因的检测与鉴定筛选、获取合适的目的基因答案解析【答案】很抱歉，登录后才可免费查看答案和解析！

注：LacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X﹣gal，从而使菌落显现出蓝色。若无该基因或该基因被破坏，则菌落则成白色。
（1）提取紫苏细胞的总RNA经过________得到的cDNA，经_______技术扩增得到DGAT1基因，与克隆质粒pMD19连接，将连接产物导入到经CaCl₂处理后的处于__________的大肠杆菌细胞，并接种到添加__________的培养基上培养，一段时间后，挑选颜色为__________的菌落用液体培养基培养，提取质粒pMD19-DGAT1。
（2）用限制酶酶切pMD19-DGAT1获得DGAT1基因，并与酶切后的载体pBI121连接得到________，并导入到四尾栅藻。DGAT1基因序列两端无限制酶酶切位点，由表1中信息推测扩增DGAT1基因时所用一对引物的一端分别加上的限制酶识别序列是_______________。
表1限制酶及其识别序列

限制酶	识别序列
BamH Ⅰ	5’-GGATCC-3’ 3’-CCTAGG-5’
Hind Ⅲ	5’-AAGCTT-3’ 3’-TTCGAA-5’
EcoR Ⅰ	5’-GAATTC-3’ 3’-CTTAAG-5’
Xba Ⅰ	5’-TCTAGA-3’ 3’-AGATCT-5’

（3）对获得的转基因四尾栅藻检测的方法有__________（写出两种方法）。
（4）研究人员利用地热废水培养转基因四尾栅藻并检测其油脂含量，结果如图2。

结果显示：__________________。
（5）为检测转基因四尾栅藻对地热废水的去污能力，研究人员设计实验并得到相应实验结果如表2。
表2 培养转基因四尾栅藻的地热废水各项指标测定结果

各项指标	总氮（mg/L）	总磷（mg/L）	氟化物（mg/L）
废水培养基	23.3	4.32	4.56
培养转基因四尾栅藻11天后	1.9	0.45	0.84

该实验不能说明转DGAT1基因显著提高了四尾栅藻的去污能力。请进一步完善实验设计。____________。

近年来，生物柴油作为新型能源已经成为世界上应用最广泛、发展迅猛的可再生能源之一。研究人员利用基因工程的方法将油料作物紫苏DGAT1基因导入四尾栅藻（操作过程如下图），获得转基因的产油微藻，并利用地热废水培养，不仅能生产生物柴油，还能治理地热废水。请回答：

限制酶及其识别序列

限制酶	识别序列
BamHⅠ	5′-GGATCC-3′ 3′-CCTAGG-5′
Hind Ⅲ	5′-AAGCTT-3′ 3′-TTCGAA-5′
EcoR Ⅰ	5′-GAATTC-3′ 3′-CTTAAG-5′
Xba Ⅰ	5′-TCTAGA-3′ 3′-AGATCT-5′