人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，以传统方法只能从血浆中制备，科学家利用基因工程和细胞工程技术制得了重组HSA（rHSA）。回答下列问题：(1)获取HS-组卷网

非选择题-解答题适中0.65 引用4 组卷336

人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，以传统方法只能从血浆中制备，科学家利用基因工程和细胞工程技术制得了重组HSA（rHSA）。回答下列问题：
(1)获取HSA基因的途径之一是：提取总RNA，利用____酶合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。已知HSA基因一条链两端的序列为5'AAGGGCGG-HSA基因-GGGAAACT3'，根据其两端序列，则需要选择的一对引物序列是____（填字母）。若某一双链cDNA在PCR仪中进行了5次循环，则需要消耗____个引物。
A．引物I是5'-AAGGGCGG—3'，引物Ⅱ是5'-GGGAAACT-3'
B．引物I是5'-AAGGGCGG—3'，引物Ⅱ是5'-AGTTTCCC-3'
C．引物I是5'-CCGCCCTT-3'，引物Ⅱ是5'-GGGAAACT-3'
D．引物I是5'-CCGCCCTT-3'，引物Ⅱ是5'-AGTTTCCC-3'
(2)如图甲为获取的含有HSA基因的DNA片段，中间一段为HSA基因。Sau3AI、EcoRI、BamHI为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图乙是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图丙是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。

为保证目的基因和质粒正确连接，切割含有目的基因的DNA片段和质粒经常都会用到两种限制酶，在该实验中，切割含有目的基因DNA片段的两种限制酶和切割质粒的两种限制酶是否完全相同?____，原因是____。
(3)若要在水稻胚乳细胞中提取rHSA，需要用到植物组织培养技术，该技术的原理是____；若要利用乳腺生物反应器来生产rHSA，则应将构建的基因表达载体导入____中。

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知识点：植物组织的培养及基本过程PCR扩增的原理与过程DNA重组技术的基本工具将目的基因导入受体细胞答案解析【答案】很抱歉，登录后才可免费查看答案和解析！

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基因编辑是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术或过程。两位女科学家因发现“CRISPR / Cas9基因剪刀”而获得2020年诺贝尔化学奖。CRISPR/Cas9系统可对基因组进行定点编辑，其工作原理如图1所示。人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，只能从血浆中制备，以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径如图2所示。请回答下列问题：

(1)据图1可知，在sgRNA1和sgRNA2的引导下，Cas9使基因中的_____键断裂，最终实现对靶基因序列的编辑。但该技术有时存在编辑对象出错而造成“脱靶”，实验发现sgRNA的序列长短影响成功率，越短脱靶率越_____（填“高”或“低”）。
(2)获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取总RNA合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因（5′CTTCGAAATTC﹣HSA基因﹣TCTCCCGATCGG 3′ ），根据其两端序列，则需要选择的一对引物序列是_____（填字母）。若一条单链 cDNA在 PCR仪中进行4次循环，则需要消耗_____个引物。
A．引物Ⅰ是5′﹣CTTCGAAATTC﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣CCGATCGGGAGA﹣3′
B．引物Ⅰ是5′﹣CTTCGAAATTC﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣TCTCCCGATCGG﹣3′
C．引物Ⅰ是5′﹣GAAGCTTTAAG﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣AGAGGGCTAGCC﹣3′
D．引物Ⅰ是5′﹣GAAGCTTTAAG﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣CCGATCGGGAGA﹣3′
(3)下图甲为获取的含有目的基因（HAS基因）的DNA片段，Sau3A Ⅰ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图乙是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图丙是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。

若用BamHⅠ切割图甲所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用_____切割图丙所示质粒，以便构建基因表达载体，上述方案存在一定缺陷，故切割图甲所示DNA片段的最佳方案是选用_____酶。用上述最佳方案构建基因表达载体，所得重组质粒_____（选填“能”、“不能”或“不一定能”）被Bam HⅠ切割。
(4)启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是_____（填字母）。

A．人血细胞启动子	B．水稻胚乳细胞启动子
C．大肠杆菌启动子	D．农杆菌启动子

(5)若利用乳腺生物反应器来生产rHSA，则应将重组HSA导入_____。为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与_____的生物学功能一致。

基因编辑是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术或过程。两位女科学家因发现“CRISPR/Cas9基因剪刀”而获得2020年诺贝尔化学奖。CRISPR/Cas9系统可对基因组进行定点编辑，其工作原理如图1所示。人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，只能从血浆中制备，以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径如图2所示。请回答下列问题：

(1)据图1可知，在sgRNA1和sgRM2的引导下，Cas9切下DNA片段断裂______________个磷酸二酯键，实现对靶基因序列的编辑。但该技术有时存在编辑对象出错而造成“脱靶”，实验发现sgRNA的序列长短影响成功率，越短脱靶率越_______________（填“高”或“低”）、
(2)获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取总RNA合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因（5'CTTCGAAATTC-HSA基因-TCTCCCGATCGG3'），根据其两端序列，则需要选择的一对引物序列是_______________（填字母）。若一条单链cDNA在PCR仪中进行4次循环，则需要消耗_______________个引物。
A．引物I是5'-GAAGCTTTAAG-3′，引物Ⅱ是5'-AGAGGGCTAGCC-3'
B．引物I是5'-CTTCGAMATTC-3′，引物Ⅱ是5'-TCTCCCGATCGG-3'
C．引物I是5'-CTTCGAAATTC-3′，引物Ⅱ是5'-CCGATCGGGAGA-3'
D．引物I是5'-GAACCTTTAAG-3′，引物Ⅱ是5′-CCGATCGGGAGA-3'
(3)下图甲为获取的含有目的基因（HAS基因）的DNA片段，Sau3AI、EcoRI、BamHI为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点：图乙是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图：图丙是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。

若用BamHI切割图甲所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用_____________切割图丙所示质粒，以便构建基因表达载体，该方案的缺陷是_____________。故切割图甲所示DNA片段的最佳方案是选用____________酶。用上述最佳方案构建基因表达载体，所得重组质粒_____________（选填“能”、“不能”或“不一定能”）被BamHI切割。
(4)人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。与图2中途径Ⅱ相比，选择途径I获取rHSA的优势是____________。
(5)若利用乳腺生物反应器来生产rHSA，则应将重组HSA导入____________。为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与_____________的生物学功能一致。

基因编辑是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术或过程。两位女科学家因发现“CRISPR / Cas9基因剪刀”而获得2020年诺贝尔化学奖。CRISPR/Cas9系统可对基因组进行定点编辑，其工作原理如图1所示。人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值，只能从血浆中制备，以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径如图2所示。请回答下列问题：

（1）据图1可知，在sgRNA的引导下，Cas9利用其具有的______个内切酶活性位点，使基因中的______________断裂。
（2）获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取______合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因（5′CTTCGAAATTC﹣HSA基因﹣TCTCCCGATCGG 3′ ），根据其两端序列，则需要选择的一对引物序列是_________ （填字母）。
A．引物Ⅰ是5′﹣CTTCGAAATTC﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣CCGATCGGGAGA﹣3′
B．引物Ⅰ是5′﹣CTTCGAAATTC﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣TCTCCCGATCGG﹣3′
C．引物Ⅰ是5′﹣GAAGCTTTAAG﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣AGAGGGCTAGCC﹣3′
D．引物Ⅰ是5′﹣GAAGCTTTAAG﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣CCGATCGGGAGA﹣3′
（3）下图甲为获取的含有目的基因（HAS基因）的DNA片段，Sau3A Ⅰ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图乙是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图丙是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。

若用BamHⅠ切割图甲所示的DNA片段，获得目的基因，则需选用____切割图丙所示质粒，以便构建基因表达载体，该方案的缺陷是___________________。故切割图甲所示DNA片段的最佳方案是选用________酶。用上述最佳方案构建基因表达载体，所得重组质粒____(选填“能”、“不能”或“不一定能”)被Bam HⅠ切割。
（4）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。与图2中途径Ⅱ相比，选择途径I获取rHSA的优势是_________________________________________。
（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与____的生物学功能一致。

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