为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达，运用重组酶技术构建质粒。重组酶技术指的是重组酶通过识别两个DNA片段上的特定相同序列，将不同DNA片段连接，从而实现DNA重组，如下图1所示。请回答下列问题：

(1)分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时，配制的两个反应体系中不同的有______。PCR技术扩增循环中温度最低的步骤是______,添加dNTP的目的是______,同时缓冲液中通常还需加入______以激活耐高温的Taq DNA聚合酶。
(2)有关基因序列如下图2。引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用______。

(3)运用重组酶技术构建质粒：当融合基因两侧的小段序列与线性质粒载体上某序列相同时，将其混合后，在重组酶作用下可将融合基因与质粒连接，形成环化质粒。该技术与双酶切一样可以保证融合基因与质粒的______,但重组效率比双酶切高，而且可以不受质粒上______的限制，可以通过合理设计引物在任意位点插入融合基因。环化质粒可直接用于导入经______处理的大肠杆菌，完成______实验。
(4)如图1所示，转化后的大肠杆菌需选择培养基进行筛选，下列叙述错误的有______。

A．是否产生氨苄青霉素可作为筛选大肠杆菌是否转化的依据

B．转化后的大肠杆菌需培养一段时间后接种至选择培养基进行筛选

C．将梯度稀释后的菌液用接种环在培养基表面进行划线获得单菌落

D．选择培养基上常常会出现大量杂菌形成的菌落

(5)为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计，用不同菌落的质粒为模板，用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增，质粒P1~P4的扩增产物电泳结果如图3。根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有______。

(6)对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒，通常需进一步通过基因测序确认，原因是______。