非选择题-解答题 较易0.85 引用1 组卷184
某水体中的污染物M具有较强的致癌作用,为了检测水体中化合物M的含量,科研人员将图1中的可被化合物M激活的启动子插入到图2质粒的P区构建重组质粒,并将重组质粒导入大肠杆菌获得能够指示M含量的工程菌。回答下列问题:
(1)利用PCR对图1中的启动子进行扩增时需要向缓冲液中加入启动子序列、4种脱氧核苷酸、_____________ 、_____________ 和2种引物,加入引物的作用是________________ 。
(2)图1中箭头的方向表示启动子转录的方向,为使启动子正确插入到质粒并驱动SPP基因转录,利用PCR技术扩增启动子时,分别在启动子A端和B端添加限制酶_____________ 和_____________ 的酶切位点。
(3)为了检查重组DNA是否构建成功,可使用(2)中的两种限制酶分别对质粒和表达载体进行切割,并对酶切产物进行凝胶电泳。若切割质粒后电泳得到_____________ 条DNA带、切割基因表达载体后电泳得到_____________ 条DNA带、则说明表达载体构建成功。
(4)将基因表达载体导入大肠杆菌前,一般先用Ca2+处理大肠杆菌,其目的是___________ 。若质粒中的SPP基因表达产物可使大肠杆菌等细菌裂解,请写出利用工程菌检测水体是否被化合物M污染的实验思路,并预期实验结果及结论:________________________ 。
(1)利用PCR对图1中的启动子进行扩增时需要向缓冲液中加入启动子序列、4种脱氧核苷酸、
(2)图1中箭头的方向表示启动子转录的方向,为使启动子正确插入到质粒并驱动SPP基因转录,利用PCR技术扩增启动子时,分别在启动子A端和B端添加限制酶
(3)为了检查重组DNA是否构建成功,可使用(2)中的两种限制酶分别对质粒和表达载体进行切割,并对酶切产物进行凝胶电泳。若切割质粒后电泳得到
(4)将基因表达载体导入大肠杆菌前,一般先用Ca2+处理大肠杆菌,其目的是
23-24高三上·河北石家庄·阶段练习
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