非选择题-解答题 较难0.4 引用1 组卷259
生物工程,长期高血糖可引发血管细胞衰老。科研人员为研究S蛋白在因高血糖引发的血管细胞衰老中的作用,以腺病毒为载体将编码S蛋白的S基因导入血管细胞,实现S蛋白在血管细胞中的大量表达。腺病毒的遗传物质为DNA,其复制需要E1、E2、E3基因共同完成。为将S基因导入腺病毒,科研人员首先构建了含S基因的重组质粒,过程如图1所示。图中PacI、EcoRI、BamHI、PmeI表示相关限制酶的酶切位点。
(1)科研人员将S基因用______ (具体名称)酶切后,用DNA连接酶连入质粒I,得到重组质粒I(图1甲所示),导入大肠肝菌。用添加______ 的培养基筛选,对所长出的单菌落提取质粒,通过PCR的方法可鉴定重组质粒I是否插入了S基因。
(2)用PrmeI酶切重组质粒I获得DNA片段。将此DNA片段与质粒I(图1乙所示)共同转化BJ细菌。在BJ细菌体内某些酶的作用下,含同源序列的DNA片段(图1甲、乙所示的左臂、右臂)可以发生类似____________的过程,产生重组质粒IT(图1丙所示)。
(3)将含S基因的重组质粒II,用___________ (具体名称)酶切后,获得改造后的腺病毒DNA.将其导入A细胞(A细胞含有E3基因,可表达E3蛋白),如图2所示。腺病毒DNA在A细胞内能够________ 从而产生大量重组腺病毒。
(4)综合上述信息,从生物安全性角度分析重组腺病毒载体的优点:_______________ 。
(5)用含S基因的重组腺病毒分别感染正常人及糖尿病患者的血管细胞,使S蛋白在血管细胞中大量表达。提取正常人、糖尿病患者及两者转入S基因后的血管细胞的蛋白,用抗原抗体特异性杂交方法检测I蛋白(一种能促进细胞衰老的蛋白)的表达量,结果如图3所示。实验结果显示2组血管细胞中I蛋白表达量最高,推测S蛋白对高血糖引发的血管细胞衰老的作用及机制是____________________ 。
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(1)科研人员将S基因用
(2)用PrmeI酶切重组质粒I获得DNA片段。将此DNA片段与质粒I(图1乙所示)共同转化BJ细菌。在BJ细菌体内某些酶的作用下,含同源序列的DNA片段(图1甲、乙所示的左臂、右臂)可以发生类似____________的过程,产生重组质粒IT(图1丙所示)。
A.基因突变 | B.交叉互换 | C.自由组合 | D.染色体数目变异 |
(4)综合上述信息,从生物安全性角度分析重组腺病毒载体的优点:
(5)用含S基因的重组腺病毒分别感染正常人及糖尿病患者的血管细胞,使S蛋白在血管细胞中大量表达。提取正常人、糖尿病患者及两者转入S基因后的血管细胞的蛋白,用抗原抗体特异性杂交方法检测I蛋白(一种能促进细胞衰老的蛋白)的表达量,结果如图3所示。实验结果显示2组血管细胞中I蛋白表达量最高,推测S蛋白对高血糖引发的血管细胞衰老的作用及机制是
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