非选择题-解答题 适中0.65 引用2 组卷344
人血清白蛋白(HSA)是由肝脏细胞合成的,具有重要的医用价值,原本只能从血清中提取,现利用基因工程的方法生产HAS。请结合相关知识回答下列问题。
(图甲为获取的含HAS基因的DNA片段及酶切位点:图乙是三种限制酶的识别序列:图丙为质粒结构示意图)
(1)科研人员利用人肝细胞中的_______________ 构建出_______________ 文库,通过该方法合成的DNA含量较少,可通过PCR进行扩增获取较多的DNA分子,根据该基因的序列(5'CTAGGTCGAAATTC…TCTCCAACGATCGG3'),应选择_______________ 作为PCR的引物。
A.引物Ⅰ是5′-CTAGGTCGAAATTC-3′,引物Ⅱ是5′-CCGATCGTTGGAGA-3'
B.引物Ⅰ是5′-CTAGGTCGAAATTC-3′,引物Ⅱ是5′-TCTCCAACGATCGG-3'
C.引物Ⅰ是5′-GATCCAGCTTTAAG-3',引物Ⅱ是5'-AGAGGTTGCTAGCC-3
D.引物Ⅰ是5′-GATCCAGCTTTAAG-3',引物Ⅱ是5′-CCGATCGTTGGAGA-3'
为使HSA基因能与质粒正确连接根据图甲、乙、丙,应选择的限制酶_______________ 切割目的基因。
(2)PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测,常采用电泳的方法。PCR产物加到加样孔中,加样孔一端应朝向电极的_______________ 极。电泳一段时间后进行检测,若电泳带有_______________ 条,且与DNAMarker对比,产物大小正确,表明PCR扩增成功。
(3)目的基因与质粒连接后可以导入到不同的受体细胞中进行表达。若导入到原核生物大肠杆菌中,可用CaCl2处理大肠杆菌,使之成为_______________ 细胞,有利于重组质粒的导入。但由于原核细胞中缺少_______________ 等细胞器,不能对表达产物进行加工,可能会影响蛋白质的功能。若将重组质粒导入到真核细胞,如小鼠细胞中,则可避免上述问题的产生。现利用小鼠乳腺作为生物反应器生产该蛋白,可将重组质粒通过_______________ 法导入小鼠的_______________ 细胞中,然后将转化的细胞进行培养,由于无法进行全体外胚胎培养,_______________ 成为胚胎工程中获得转基因小鼠的唯一方法。利用_______________ 技术检测小鼠乳腺分泌物,可以判断目的基因是否表达。
(图甲为获取的含HAS基因的DNA片段及酶切位点:图乙是三种限制酶的识别序列:图丙为质粒结构示意图)
(1)科研人员利用人肝细胞中的
A.引物Ⅰ是5′-CTAGGTCGAAATTC-3′,引物Ⅱ是5′-CCGATCGTTGGAGA-3'
B.引物Ⅰ是5′-CTAGGTCGAAATTC-3′,引物Ⅱ是5′-TCTCCAACGATCGG-3'
C.引物Ⅰ是5′-GATCCAGCTTTAAG-3',引物Ⅱ是5'-AGAGGTTGCTAGCC-3
D.引物Ⅰ是5′-GATCCAGCTTTAAG-3',引物Ⅱ是5′-CCGATCGTTGGAGA-3'
为使HSA基因能与质粒正确连接根据图甲、乙、丙,应选择的限制酶
(2)PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测,常采用电泳的方法。PCR产物加到加样孔中,加样孔一端应朝向电极的
(3)目的基因与质粒连接后可以导入到不同的受体细胞中进行表达。若导入到原核生物大肠杆菌中,可用CaCl2处理大肠杆菌,使之成为
23-24高三上·浙江·开学考试
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人血清白蛋白(HSA)主要由肝细胞产生,在临床上的需求量大,由于其来源有限和有生物污染的风险,重组人血清白蛋白(rHSA),成为其重要的替代品。科研人员将HSA基因转入酵母菌细胞,获得了重组人血清白蛋白。如图为酵母菌基因改造以及工业化发酵生产rHSA的过程示意图,其中I、II、III、IV是四种不同的限制酶,具各自识别的酶切位点如表所示。
(1)若要将HSA基因正确插入质粒中,最好选择限制酶____ 进行共同切割,重组基因表达载体中的启动子的作用是____ 。
(2)为筛选出含重组质粒的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到甲、乙、丙三类菌落,三类菌落形态相同,生长情况如下图所示,则成功导入目的基因的重组质粒的菌落类型是____ 类,未导入质粒的菌落类型是____ 类;(填字母类型)(3)科研人员提取人肝细胞中的mRNA,并通过反转录法构建了HSA基因,该基因其中一条链的序列为(5'-CCGATCGTTGGAGA…GAATTTCGACCTAG-3'),若通过PCR进行扩增,已知其中一种引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3',则另一种引物的序列为____ (答出6个碱基序列即可)。
(4)PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测,常采用电泳的方法。电泳一段时间后进行检测,若电泳带有____ 条,且与DNAMarker对比,产物大小正确,表明PCR扩增成功。
(5)有人提议将乳腺反应器改成膀胱反应器,请分析利用膀胱反应器比乳腺反应器产量高的原因____ (答出两点即可)。
限制酶 | Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ |
识别序列及切割位点 |
(1)若要将HSA基因正确插入质粒中,最好选择限制酶
(2)为筛选出含重组质粒的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到甲、乙、丙三类菌落,三类菌落形态相同,生长情况如下图所示,则成功导入目的基因的重组质粒的菌落类型是
(4)PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测,常采用电泳的方法。电泳一段时间后进行检测,若电泳带有
(5)有人提议将乳腺反应器改成膀胱反应器,请分析利用膀胱反应器比乳腺反应器产量高的原因
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