非选择题-解答题 较难0.4 引用7 组卷5266
为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达,运用重组酶技术构建质粒,如图1所示。请回答下列问题:______ ,扩增程序中最主要的不同是______ 。
(2)有关基因序列如图2.引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用______。
(3)将PCR产物片段与线性质粒载体混合后,在重组酶作用下可形成环化质粒,直接用于转化细菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比,无需使用的酶主要有_______ 。
(4)转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选,下列叙述错误 的有_______。
(5)为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计,用不同菌落的质粒为模板,用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增,质粒P1~P4的扩增产物电泳结果如图3.根据图中结果判断,可以舍弃的质粒有______ 。______ 。
(1)分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时,配制的两个反应体系中不同的有
(2)有关基因序列如图2.引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用______。
A.ATGGTG------CAACCA |
B.TGGTTG------CACCAT |
C.GACGAG------CTGCAG |
D.CTGCAG------CTCGTC’ |
(4)转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选,下列叙述
A.稀释涂布平板需控制每个平板30~300个菌落 |
B.抗性平板上未长出菌落的原因一般是培养基温度太高 |
C.抗性平板上常常会出现大量杂菌形成的菌落 |
D.抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化 |
(6)对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒,通常需进一步通过基因测序确认,原因是
2023·江苏·高考真题
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纳米抗体具备体积小、结构简单、稳定性显著等优点,而带荧光蛋白的纳米抗体可以帮助我们了解蛋白质在细胞或生物体内的定位和功能,荧光-抗体融合复合物可作为靶向生物分子进行疾病诊断和治疗等。为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达,运用重组酶技术构建质粒。重组酶技术指的是重组酶通过识别两个DNA片段上的特定相同序列,将不同DNA片段连接,从而实现DNA重组,如下图1所示。请回答下列问题:(1)分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时,配制的两个反应体系中不同的有____ 。
(2)有关基因序列如下图2.引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用____ 。(3)将PCR产物片段与线性质粒载体混合后,在重组酶作用下可形成环化质粒,之后转化大肠杆菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比,无需使用的酶主要有____ 。
(4)如图1所示,转化后的大肠杆菌需选择培养基进行筛选,下列叙述正确的有____。
(5)为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计,用不同菌落的质粒为模板,用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增,质粒P1~P4的扩增产物电泳结果如图3.根据图中结果判断,可以舍弃的质粒有____ 。(6)对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒,通常需进一步通过基因碱基序列测定确认,原因是____ 。
(2)有关基因序列如下图2.引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用
(4)如图1所示,转化后的大肠杆菌需选择培养基进行筛选,下列叙述正确的有____。
A.是否产生氨苄青霉素可作为筛选大肠杆菌是否转化的依据 |
B.转化后的大肠杆菌需培养一段时间后接种至选择培养基进行筛选 |
C.将梯度稀释后的菌液用接种环在培养基表面进行划线获得单菌落 |
D.选择培养基上常常会出现大量杂菌形成的菌落 |
为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达,运用重组酶技术构建质粒。重组酶技术指的是重组酶通过识别两个DNA片段上的特定相同序列,将不同DNA片段连接,从而实现DNA重组,如下图1所示。请回答下列问题:
(1)分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时,配制的两个反应体系中不同的有______ 。PCR技术扩增循环中温度最低的步骤是______ ,添加dNTP的目的是______ ,同时缓冲液中通常还需加入______ 以激活耐高温的Taq DNA聚合酶。
(2)有关基因序列如下图2。引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用______ 。
(3)运用重组酶技术构建质粒:当融合基因两侧的小段序列与线性质粒载体上某序列相同时,将其混合后,在重组酶作用下可将融合基因与质粒连接,形成环化质粒。该技术与双酶切一样可以保证融合基因与质粒的______ ,但重组效率比双酶切高,而且可以不受质粒上______ 的限制,可以通过合理设计引物在任意位点插入融合基因。环化质粒可直接用于导入经______ 处理的大肠杆菌,完成______ 实验。
(4)如图1所示,转化后的大肠杆菌需选择培养基进行筛选,下列叙述错误的有______。
(5)为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计,用不同菌落的质粒为模板,用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增,质粒P1~P4的扩增产物电泳结果如图3。根据图中结果判断,可以舍弃的质粒有______ 。
(6)对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒,通常需进一步通过基因测序确认,原因是______ 。
(1)分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时,配制的两个反应体系中不同的有
(2)有关基因序列如下图2。引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用
(3)运用重组酶技术构建质粒:当融合基因两侧的小段序列与线性质粒载体上某序列相同时,将其混合后,在重组酶作用下可将融合基因与质粒连接,形成环化质粒。该技术与双酶切一样可以保证融合基因与质粒的
(4)如图1所示,转化后的大肠杆菌需选择培养基进行筛选,下列叙述错误的有______。
A.是否产生氨苄青霉素可作为筛选大肠杆菌是否转化的依据 |
B.转化后的大肠杆菌需培养一段时间后接种至选择培养基进行筛选 |
C.将梯度稀释后的菌液用接种环在培养基表面进行划线获得单菌落 |
D.选择培养基上常常会出现大量杂菌形成的菌落 |
(5)为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计,用不同菌落的质粒为模板,用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增,质粒P1~P4的扩增产物电泳结果如图3。根据图中结果判断,可以舍弃的质粒有
(6)对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒,通常需进一步通过基因测序确认,原因是
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