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非选择题-解答题 适中0.65 引用1 组卷323
定点诱变技术是近年来生物工程研究中发展迅速的一个领域。通过定点诱变可以在体外改造目的DNA分子,进而研究基因的表达以及蛋白质的结构与功能之间的关系。经典的大引物PCR定点诱变技术成为基于PCR的定点诱变技术中应用最普遍的方法,操作过程如图甲。研究者欲改造某基因并将其导入大肠杆菌的质粒中保存,该质粒含有氨青霉素抗性基因、LacZ基因及一些酶切位点,结构如图乙。回答下列问题:
   
(1)利用大引物PCR进行定点诱变需要进行两轮PCR(PCR1和PCR2),在PCR1中,至少需要______个循环才能获得图甲所示的大引物。在PCR2中,要获得带有诱变点的改良基因,引物应选用大引物两条链中的______(填“①”或“②”)。
(2)为实现质粒和改良基因的高效连接,选用限制酶XmaⅠ而不选用限制酶SmaⅠ的原因是______。为将改良基因构建在质粒上,还需要______等酶。
(3)在构建改良基因表达载体时,有的质粒含有改良基因,有的质粒为空白质粒,将含上述组件的溶液加入到大肠杆菌菌液中,适宜温度下培养一段时间后,再将菌液涂布在含氨苄青霉素和______的平板上。一段时间后,在培养基上出现白色和蓝色两种菌落,其中______菌落含有重组质粒,判断的依据是______
22-23高二下·广东广州·期末
知识点:PCR扩增的原理与过程基因表达载体的构建目的基因的检测与鉴定 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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