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非选择题-解答题 适中0.65 引用1 组卷50
科研人员将l-1基因导入植物的体细胞中，经过一系列过程得到试管苗。如图，回答下列问题：
   
(1)通过PCR扩增获取l-1基因时，组成一轮PCR循环包括变性、__________、__________三个步骤。PCR扩增与细胞内DNA复制相比， 相同点有__________（答出2点即可）。
(2)图中①是基因工程基本操作程序中的__________过程， 该过程需用__________处理l-1基因和 Ti质粒。
(3)图中④是植物组织培养过程中的__________过程， 该过程要进行照光培养，作用是__________。
22-23高二下·云南玉溪·期末
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知识点：植物组织的培养及基本过程PCR扩增的原理与过程基因表达载体的构建 答案解析 【答案】很抱歉，登录后才可免费查看答案和解析！
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为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。回答下列问题：

(1)酶D基因和转运肽基因所含的三种限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切点如图甲所示，现为获得融合基因，研究人员采用PCR法扩增酶D基因，首先要依据基因两端的碱基序列设计____________ ，同时从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，再用________和________酶处理两个基因后，即可得到________端与_________端（填图中字母）相连的融合基因。
(2)用PCR法扩增酶D基因时，每次循环可分为_______ 、_______ 、_______ 三步，其中第三步所使用的酶是___________ 。
(3)将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，构建____________ 并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含____________ 的培养基上，其目的是得到含融合基因的农杆菌，再利用液体培养基振荡培养，可以得到用于转化的侵染液。
(4)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_____________________ ，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过___________ 技术，可培育成转基因由此植株。
In-Fusion 技术是一项新型的无缝克隆技术。该技术的关键是要在目的基因两端构建与线性化质粒末端相同的DNA 序列（即同源序列，通常为15~20 bp），然后用In-Fusion酶（能识别双链线性化 DNA 片段：5'→3'末端任意16个碱基，使其降解）处理即可实现无缝连接。其操作步骤如图。回答下列问题：

(1)通过PCR 扩增需要用到引物，引物的作用是_____。在设计引物时最好在引物的_____端添加限制酶的识别序列。引物 A 或引物 B要依据_____的序列进行设计。若目的基因通过PCR 循环5次，需要消耗引物_____个，经过程②扩增n次，得到符合要求的目的基因片段数量为_____。
(2)PCR 过程包括变性、复性、_____。其中复性时温度需要降低到50℃左右的目的是_____。
(3)图中同源序列1、2 中的碱基序列一般不同，这样设计的原因是_____。
(4)将同源序列1和2与线性化质粒连接成重组质粒需要_____的作用，若将重组质粒导入植物细胞，则常用的方法为_____。与传统构建重组质粒的方法相比， In-Fusion技术的优势之一是_____。
结合下图，回答有关植物转基因和克隆的问题：

（1）Ti质粒携带的目的基因是位于Ti质粒的__________中。愈伤组织细胞是具有__________能力的薄壁细胞。
（2）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，第三步是将目的基因导入受体细胞，图中属于该步的编号是__________，导入方法是__________。
（3）如果目的基因序列已知，常用PCR扩增技术来获取目的基因，该技术中，引物序列的设计是关键。设计引物时，需要避免引物之间发生__________而造成引物失效。为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，常在两条引物上设计加入不同的限制酶识别位点，主要目的是__________。
（4）__________技术常用于植物克隆，图中属于该过程的编号是__________。

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