试题详情
非选择题-解答题 适中0.65 引用1 组卷68
近段时间120万元一针的抗癌药物阿基仑赛注射液备受关注,其实质是一种特异性免疫治疗方法(CAR-T)。该方法首先提取患者的外周血T细胞,再通过对T细胞进行基因重组增强T细胞特异性识别肿瘤抗原的能力,通过将改造后的T细胞在体外大量增殖再输回到患者体内用于杀伤肿瘤细胞。因其为个性化的治疗方案,所以这种疗法价格昂贵。回答下列有关问题:
(1)通过基因工程改造T细胞时,目的基因体外扩增需要对两种引物进行设计,为了确保目的基因与运载体正确拼接,在设计引物时需添加_____位点;扩增过程包括_____三个阶段,至少经过_____轮复制才可以扩增出两条链等长的目的基因。
(2)T细胞的体外增殖需要配制培养基,悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为_____,当细胞分裂生长到表面相互接触时就会出现_____,需要用_____处理,然后分瓶培养以获取大量T细胞。
(3)除上述疗法外,单克隆抗体治疗发展也很迅速,通过单抗与恶性肿瘤细胞表面表达的特异性抗原的结合以及后续的一系列反应使细胞凋亡。制备单抗过程中需要将__________融合,然后还要进行抗体阳性筛选,最终获取融合细胞大量培养。
2023·安徽·模拟预测
知识点:PCR扩增的原理与过程动物细胞融合与单克隆抗体的制备动物细胞培养技术 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
类题推荐
癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞,克服肿瘤的免疫逃逸,在癌症治疗方法中取得越来越突出地位,科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。

  

(1)某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1,如图1。PD-L1能抑制T细胞的活化,使癌细胞发生免疫逃逸。单克隆抗体的优点在于_________。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内,经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果,取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。在融合前三天,对1号小鼠加强免疫一次,目的是_________________________。然后取小鼠的脾脏细胞用______试剂诱导与骨髓瘤细胞融合,用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。
(2)一段时间后,将(1)所得细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,检测原理如上图。
①在检测时需要将PD-1蛋白固定于周相载体表面制成固相抗原,并加入多孔板培养槽中的__(细胞、上清液),即待测样本。
②加入酶标抗体后一段时间,需要用洗涤剂将未与____________________结合的酶标抗体洗去。
③加入相应酶促反应底物显色后,颜色的深浅可代表____________________
(3)CD28是T细胞表面受体,T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此,科研人员尝试构建既能结合PSMA,还能结合CD28的双特异性抗体PSMAXCD28,诱导T细胞定向杀伤癌细胞,如图2。制备过程为:先将__________分别注射到小鼠体内,分离出B淋巴细胞,诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合,筛选得到两种杂交瘤细胞,再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链,由于L链和H链的随机组合会_________。因此还需进行筛选才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。

(4)在肿瘤患者的治疗中,被动免疫治疗是指被动地将具有抗肿瘤活性的免疫制剂或细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗,该治疗方案适用于肿瘤晚期患者,除了单克隆抗体治疗外,还可以从肿瘤患者体内分离免疫活性细胞,在体外增殖和鉴定,再回输至患者体内。从肿瘤患者体内获取的免疫细胞置于适宜环境下培养,培养过程中会出现分裂受阻,其原因主要有________(答出2点)。
当前新冠病毒的主要检测手段有核酸检测法和免疫学检测法。请回答下列问题:
(1)核酸检测方法:目前,新冠病毒的实验室检测主要依赖核酸检测,包括以下两种方法:
①全基因组测序:病原体宏基因组测序(mNGS)是目前临床实践中最常用的病原体基因测序方法。mNGS技术首先需要将病毒RNA制备成测序仪可以识别和分析的DNA文库,需要将RNA___________产生的多种互补DNA片段,与___________连接后储存在_________中。然后使用测序仪对核酸序列进行检测。检测结果经生物信息学软件处理,最终展现出与病毒序列相关的信息。
②荧光PCR法:在常规PCR检测的基础上加入了荧光物质,通过监测发光信号来进行分析的一种方法。PCR利用_________的原理,实现目的基因的扩增,该过程首先需要设计引物,国家微生物科学数据中心公布了新冠病毒S蛋白的引物序列,已知其中一段引物的序列为CCCAACTTCTCCTCCTAGAAT,能否根据该引物序列设计出另一段引物的序列?_________(填“能”或“不能”),原因是_________。目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是__________。TaqMan是最为常用的一种具有荧光标记的核酸探针,能与目标基因特异性结合,利用原理是_________
(2)免疫学检测法:该技术基于血清中抗原和抗体的特异性结合进行检测。
①制备抗体:可以用到单克隆抗体的相关技术,其过程是取产生免疫反应的_______细胞与骨髄瘤细胞混合培养,使其融合,最后筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞,杂交瘤细胞可以在体外进行大规模培养或注射到_________,杂交瘤细胞的培养液中需要特殊的成分,通常需要加入_________等一些天然成分。
②制备抗原:对新冠病毒的主要结构蛋白基因进行扩增与克隆,构建基因的_______,导入大肠杆菌得到大量相关蛋白,纯化后就可以作为抗原进行检测。

组卷网是一个信息分享及获取的平台,不能确保所有知识产权权属清晰,如您发现相关试题侵犯您的合法权益,请联系组卷网