非选择题-解答题组 适中0.65 引用1 组卷164
回答
(一)科研人员从盐碱土壤中分离得到芽孢杆菌B3菌株,检测表明,该菌株能分泌抗菌肽,对大肠杆菌、沙门氏菌等具有抑菌作用,该抗菌肽生产的基本流程如下。
(1)制备粗提物:取土壤样品,加适量______ 制成悬液,经涂布分离并鉴定,再挑选相应菌落接种至LB液体培养基,振荡培养48h后离心,收集______ (填“上清液”或“沉淀物”)。
(2)分离提纯抗菌肽:①选择一种与抗菌肽具有______ (填“较弱”或“较强”)结合力的介质制备层析柱;②将粗提物溶液滴流过柱;③再用某种盐溶液洗涤层析柱,获得含抗菌肽的洗脱液,其中影响盐溶液洗脱效果的因素有盐浓度,还有______ 。
(3)抑菌效果检测:①在培养基尚未凝固时加入适量的大肠杆菌菌液,制成试验平板备用;②制备无菌滤纸小圆片,浸泡于经______ 灭菌的抗菌肽溶液;③取出小纸片置于试验平板中培养一段时间后测定______ 的大小,判定抑菌效果。试验进一步观察发现,小纸片周围的细菌出现破裂、内容物流出的情况,说明抗菌肽会导致细菌______ 结构被破损。由于抗菌肽对真核细胞无毒性,可将其替代______ 使用于动物细胞培养。
(二)新冠病毒是RNA病毒,病毒的S蛋白是决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白。新冠肺炎暴发后,科研工作者争分夺秒地进行疫苗和药物的研制。回答下列问题:
(4)腺病毒载体疫苗:以新冠病毒RNA为模板经_____________ 酶合成DNA,加入引物后经_____________ 筛选并扩增S蛋白基因,与腺病毒形成重组病毒后,加入人胚胎肾细胞悬液中实现_____________ 。腺病毒是绝大多数人容易接触到的病毒,部分人群使用该疫苗效果不理想,可能的原因是_____________ 。
(5)连翘是治疗新冠肺炎中药配方中的重要植物。生产中常选取_____________ (A .硬枝带芽茎段B.绿枝带芽茎段C.嫩叶D.带侧根的硬根)作为外植体,采用植物组培实现优质连翘的快速繁殖。组培时,除培养基成分与性质外,还需要考虑温度、湿度、光强度_____________ 等条件。外植体先后经_____________ 过程形成试管苗,将试管苗移植到蛭石或草炭土前,应除去_____________ 以防止微生物感染。
(一)科研人员从盐碱土壤中分离得到芽孢杆菌B3菌株,检测表明,该菌株能分泌抗菌肽,对大肠杆菌、沙门氏菌等具有抑菌作用,该抗菌肽生产的基本流程如下。
(1)制备粗提物:取土壤样品,加适量
(2)分离提纯抗菌肽:①选择一种与抗菌肽具有
(3)抑菌效果检测:①在培养基尚未凝固时加入适量的大肠杆菌菌液,制成试验平板备用;②制备无菌滤纸小圆片,浸泡于经
(二)新冠病毒是RNA病毒,病毒的S蛋白是决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白。新冠肺炎暴发后,科研工作者争分夺秒地进行疫苗和药物的研制。回答下列问题:
(4)腺病毒载体疫苗:以新冠病毒RNA为模板经
(5)连翘是治疗新冠肺炎中药配方中的重要植物。生产中常选取
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回答下列(一)、(二)小题。
(一)回答与利用大豆种子提取、分离并鉴定超氧化物歧化酶(SOD酶)的有关问题:
(1)浸泡24h后的大豆种子需放入高速组织捣碎机中捣碎,其原因是________ ;往捣碎后的组织中加入适量pH7.8磷酸缓冲液,并离心除去固形物,所得的上清液即为SOD酶粗提取液,推测pH7.8磷酸缓冲液除可作为SOD酶的溶剂外,还具有________ 作用。
(2)葡萄糖凝胶(Sephadex G-75)可用于分离、纯化SOD酶。可将适量葡萄糖凝胶装入注射器中制成________ 柱,并将其固定于支架上,再用________ (仪器)滴加SOD酶粗提取液,保持一定的流速过柱,最后用缓冲液进行洗脱,洗脱液即为________ 。
(3)光照条件下核黄素与NBT反应生成蓝色产物,SOD酶则会抑制这一过程。可利用这一原理,使用分光光度计在560nm波长处测定光密度值(OD值),用于鉴定SOD酶的活力,相关的表格设计如下。
表中1号杯的作用是________ 。实验中测得的OD值与加入的酶量在一定范围内呈________ (正相关/负相关)。若将第4组加入的酶液改为澄清的SOD酶粗提取液(粗提取液中其他成分对测定结果的影响忽略不计),则OD值将________ (偏大/不变/偏小)。
(二)回答与基因工程和动物克隆有关的问题:
(4)重组腺病毒是高效的重组病毒表达系统之一,它作为表达载体可在哺乳动物细胞中高水平表达目的蛋白。已知经改造的某腺病毒株在受体细胞内既无自我复制能力,也不能整合到染色体上,利用该病毒株进行基因治疗时,对受体细胞的处理是________ (先细胞增殖,后病毒感染/先病毒感染,后细胞增殖)。该项技术________ (适用/不适用)转基因动物的克隆繁殖。
(5)若从某动物体内提取得到目的蛋白的mRNA,可采用________ 法合成目的基因,它通常与动物基因组中相应基因的核苷酸序列________ (一致/不一致)。
(6)已知新冠病毒的棘突蛋白(S蛋白)在感染受体细胞的过程中起到关键作用。可利用DNA连接酶将________ 与腺病毒DNA拼接,再将重组腺病毒导入受体细胞,以获得针对新冠病毒的疫苗。还可将S蛋白注入动物体内,一段时间后从脾脏中获取B淋巴细胞,与骨髓瘤细胞经过________ 技术进行高效细胞融合,再经多次筛选获得针对S蛋白的单克隆抗体。相对新冠患者完全康复后的血清,单克隆抗体的治疗效果更好,原因是________ (至少写出2点)。从S蛋白所占比例________ (高/低)的抗原混合物中研制获得单抗,是杂交瘤技术制备单抗的最大优点。
(一)回答与利用大豆种子提取、分离并鉴定超氧化物歧化酶(SOD酶)的有关问题:
(1)浸泡24h后的大豆种子需放入高速组织捣碎机中捣碎,其原因是
(2)葡萄糖凝胶(Sephadex G-75)可用于分离、纯化SOD酶。可将适量葡萄糖凝胶装入注射器中制成
(3)光照条件下核黄素与NBT反应生成蓝色产物,SOD酶则会抑制这一过程。可利用这一原理,使用分光光度计在560nm波长处测定光密度值(OD值),用于鉴定SOD酶的活力,相关的表格设计如下。
杯号 | 核黄素、NBT混合液(mL) | 酶液(mL) | 蒸馏水(mL) | 条件 |
1 | 3 | 0 | 0.15 | 黑暗 |
2 | 3 | 0 | 0.15 | 光照 |
3 | 3 | 0.05 | 0.10 | 光照 |
4 | 3 | 0.10 | 0.05 | 光照 |
5 | 3 | 0.15 | 0 | 光照 |
(二)回答与基因工程和动物克隆有关的问题:
(4)重组腺病毒是高效的重组病毒表达系统之一,它作为表达载体可在哺乳动物细胞中高水平表达目的蛋白。已知经改造的某腺病毒株在受体细胞内既无自我复制能力,也不能整合到染色体上,利用该病毒株进行基因治疗时,对受体细胞的处理是
(5)若从某动物体内提取得到目的蛋白的mRNA,可采用
(6)已知新冠病毒的棘突蛋白(S蛋白)在感染受体细胞的过程中起到关键作用。可利用DNA连接酶将
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