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非选择题-解答题组 适中0.65 引用1 组卷164
回答
(一)科研人员从盐碱土壤中分离得到芽孢杆菌B3菌株,检测表明,该菌株能分泌抗菌肽,对大肠杆菌、沙门氏菌等具有抑菌作用,该抗菌肽生产的基本流程如下。
   
(1)制备粗提物:取土壤样品,加适量______制成悬液,经涂布分离并鉴定,再挑选相应菌落接种至LB液体培养基,振荡培养48h后离心,收集______(填“上清液”或“沉淀物”)。
(2)分离提纯抗菌肽:①选择一种与抗菌肽具有______(填“较弱”或“较强”)结合力的介质制备层析柱;②将粗提物溶液滴流过柱;③再用某种盐溶液洗涤层析柱,获得含抗菌肽的洗脱液,其中影响盐溶液洗脱效果的因素有盐浓度,还有______
(3)抑菌效果检测:①在培养基尚未凝固时加入适量的大肠杆菌菌液,制成试验平板备用;②制备无菌滤纸小圆片,浸泡于经______灭菌的抗菌肽溶液;③取出小纸片置于试验平板中培养一段时间后测定______的大小,判定抑菌效果。试验进一步观察发现,小纸片周围的细菌出现破裂、内容物流出的情况,说明抗菌肽会导致细菌______结构被破损。由于抗菌肽对真核细胞无毒性,可将其替代______使用于动物细胞培养。
(二)新冠病毒是RNA病毒,病毒的S蛋白是决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白。新冠肺炎暴发后,科研工作者争分夺秒地进行疫苗和药物的研制。回答下列问题:
(4)腺病毒载体疫苗:以新冠病毒RNA为模板经_____________酶合成DNA,加入引物后经_____________筛选并扩增S蛋白基因,与腺病毒形成重组病毒后,加入人胚胎肾细胞悬液中实现_____________。腺病毒是绝大多数人容易接触到的病毒,部分人群使用该疫苗效果不理想,可能的原因是_____________
(5)连翘是治疗新冠肺炎中药配方中的重要植物。生产中常选取_____________(A .硬枝带芽茎段B.绿枝带芽茎段C.嫩叶D.带侧根的硬根)作为外植体,采用植物组培实现优质连翘的快速繁殖。组培时,除培养基成分与性质外,还需要考虑温度、湿度、光强度_____________等条件。外植体先后经_____________过程形成试管苗,将试管苗移植到蛭石或草炭土前,应除去_____________以防止微生物感染。
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知识点:其他微生物的分离与计数PCR扩增的原理与过程蛋白质的提取和分离的实验操作新型冠状病毒及相关 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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回答下列(一)、(二)小题:
(一)科研人员从盐碱土壤中分离得到芽孢杆菌B3菌株,检测表明,该菌株能分泌抗菌肽,对大肠杆菌、沙门氏菌等具有抑菌作用,该抗菌肽生产的基本流程如下。

(1)制备粗提物:取土壤样品,加适量______制成悬液,经涂布分离并鉴定,再挑选相应菌落接种至LB液体培养基,振荡培养48h后离心,收集______(填“上清液”或“沉淀物”)。
(2)分离提纯抗菌肽:①选择一种与抗菌肽具有______(填“较弱”或“较强”)结合力的介质制备层析柱;②将粗提物溶液滴流过柱;③再用某种盐溶液洗涤层析柱,获得含抗菌肽的洗脱液,其中影响盐溶液洗脱效果的因素有盐浓度,还有______
(3)抑菌效果检测:①在培养基尚未凝固时加入适量的大肠杆菌菌液,制成试验平板备用;②制备无菌滤纸小圆片,浸泡于经______灭菌的抗菌肽溶液;③取出小纸片置于试验平板中培养一段时间后测定______的大小,判定抑菌效果。试验进一步观察发现,小纸片周围的细菌出现破裂、内容物流出的情况,说明抗菌肽会导致细菌______结构被破损。由于抗菌肽对真核细胞无毒性,可将其替代______使用于动物细胞培养。
(二)镰刀型红细胞贫血症是一种严重的遗传病,患者的红细胞在缺氧时变为镰刀状,容易堵塞血管,导致内脏及组织缺氧。科学家利用基因工程原理,设计了一种治疗方案如图所示。

(4)获取正常血红蛋白基因后进行______,以扩大目的基因含量来提高重组效率。
(5)选择病毒作为载体,通常需对所用病毒进行一些处理,譬如降低病毒感染性以确保安全,但对于基因工程操作来说,也降低了______的效率。
(6)治疗方案中的造血干细胞应取自患者,以免移植后发生______。病毒载体将正常基因带入细胞后,最可能会将正常血红蛋白基因整合到______DNA上,也可能留在细胞核外。
(7)对于上述筛选过程,一方面要以______为抗原,经杂交瘤技术生产单克隆抗体;另一方面要将感染后的造血干细胞进行______。然后用单抗作为______筛选出目的细胞,再扩大培养后回输给患者以达到治疗效果。
回答下列(一)、(二)小题:
(一)北京冬奥会吉祥物“冰墩墩”的熊猫形象深受喜爱,研究人员从大熊猫粪便中筛选纤维素分解菌并用于燃料酒精的生产。回答下列问题:
(1)为筛选和测定大熊猫新鲜粪便中的纤维素分解菌活菌,将1g大熊猫新鲜粪便样品用_____________稀释105倍后接种至_____________培养基上培养,若观察到五个培养基上分别形成48、15、51、9和52个菌落,则1g大熊猫新鲜粪便中的纤维素分解活菌数是_______________。筛选到的目的菌接种液体培养基中,在摇床上控制转速和_____________实现扩大培养。
(2)纤维素分解菌用于燃料酒精生产的大致流程为:

过程①通常将纤维素分解菌固定化处理,有同学提出可采用锯末作为固定化介质,该方法不恰当的原因是_____________。过程①水解得到的糖液经显色反应后可用_____________法测定含量;用于过程②的酵母菌应具有耐酸和耐______________(写出2点)的优点才能提高酒精出产率。
(二)新冠病毒是RNA病毒,病毒的S蛋白是决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白。新冠肺炎暴发后,科研工作者争分夺秒地进行疫苗和药物的研制。回答下列问题:
(3)腺病毒载体疫苗:以新冠病毒RNA为模板经_____________酶合成DNA,加入引物后经_____________筛选并扩增S蛋白基因,与腺病毒形成重组病毒后,加入人胚胎肾细胞悬液中实现_____________。腺病毒是绝大多数人容易接触到的病毒,部分人群使用该疫苗效果不理想,可能的原因是_____________
(4)连翘是治疗新冠肺炎中药配方中的重要植物。生产中常选取_____________(A.硬枝带芽茎段B.绿枝带芽茎段C.嫩叶D.带侧根的硬根)作为外植体,采用植物组培实现优质连翘的快速繁殖。组培时,除培养基成分与性质外,还需要考虑温度、湿度、光强度_____________等条件。外植体先后经_____________过程形成试管苗,将试管苗移植到蛭石或草炭土前,应除去_____________以防止微生物感染。
回答下列(一)、(二)小题。
(一)回答与利用大豆种子提取、分离并鉴定超氧化物歧化酶(SOD酶)的有关问题:
(1)浸泡24h后的大豆种子需放入高速组织捣碎机中捣碎,其原因是________;往捣碎后的组织中加入适量pH7.8磷酸缓冲液,并离心除去固形物,所得的上清液即为SOD酶粗提取液,推测pH7.8磷酸缓冲液除可作为SOD酶的溶剂外,还具有________作用。
(2)葡萄糖凝胶(Sephadex G-75)可用于分离、纯化SOD酶。可将适量葡萄糖凝胶装入注射器中制成________柱,并将其固定于支架上,再用________(仪器)滴加SOD酶粗提取液,保持一定的流速过柱,最后用缓冲液进行洗脱,洗脱液即为________
(3)光照条件下核黄素与NBT反应生成蓝色产物,SOD酶则会抑制这一过程。可利用这一原理,使用分光光度计在560nm波长处测定光密度值(OD值),用于鉴定SOD酶的活力,相关的表格设计如下。

杯号

核黄素、NBT混合液(mL)

酶液(mL)

蒸馏水(mL)

条件

1

3

0

0.15

黑暗

2

3

0

0.15

光照

3

3

0.05

0.10

光照

4

3

0.10

0.05

光照

5

3

0.15

0

光照

表中1号杯的作用是________。实验中测得的OD值与加入的酶量在一定范围内呈________(正相关/负相关)。若将第4组加入的酶液改为澄清的SOD酶粗提取液(粗提取液中其他成分对测定结果的影响忽略不计),则OD值将________(偏大/不变/偏小)。
(二)回答与基因工程和动物克隆有关的问题:
(4)重组腺病毒是高效的重组病毒表达系统之一,它作为表达载体可在哺乳动物细胞中高水平表达目的蛋白。已知经改造的某腺病毒株在受体细胞内既无自我复制能力,也不能整合到染色体上,利用该病毒株进行基因治疗时,对受体细胞的处理是________(先细胞增殖,后病毒感染/先病毒感染,后细胞增殖)。该项技术________(适用/不适用)转基因动物的克隆繁殖。
(5)若从某动物体内提取得到目的蛋白的mRNA,可采用________法合成目的基因,它通常与动物基因组中相应基因的核苷酸序列________(一致/不一致)。
(6)已知新冠病毒的棘突蛋白(S蛋白)在感染受体细胞的过程中起到关键作用。可利用DNA连接酶将________与腺病毒DNA拼接,再将重组腺病毒导入受体细胞,以获得针对新冠病毒的疫苗。还可将S蛋白注入动物体内,一段时间后从脾脏中获取B淋巴细胞,与骨髓瘤细胞经过________技术进行高效细胞融合,再经多次筛选获得针对S蛋白的单克隆抗体。相对新冠患者完全康复后的血清,单克隆抗体的治疗效果更好,原因是________(至少写出2点)。从S蛋白所占比例________(高/低)的抗原混合物中研制获得单抗,是杂交瘤技术制备单抗的最大优点。

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