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非选择题-解答题 适中0.65 引用3 组卷480
注射用生长激素主要是用于内源性生长激素缺乏所引起的儿童生长障碍,还适用于重度烧伤、生长激素缺乏症等。临床常用的重组人生长激素是通过基因工程、发酵工程生产的。下图1表示生长激素基因及其上的限制酶酶切位点,图2表示质粒的结构示意图。请回答下列问题。
       
(1)生产重组人生长激素时,利用PCR技术可获取和扩增生长激素基因,扩增时需要引物,引物是指____________;PCR的产物一般通过__________来鉴定。
(2)已知DNA新链的延长方向是从5'→3',即沿模板链3'→5',若要扩增出生长激素基因并构建重组质粒,选择的引物应是图1中的___________,理由是__________
(3)构建基因表达载体时,应选择能识别图2中___________酶切位点的限制酶;所用载体除质粒以外,还可以是___________(答出2点即可)。
(4)生产中,需将基因表达载体导入大肠杆菌后进行发酵。在发酵过程中,需要及时添加养分,并严格控制温度、pH和溶氧量,原因是__________
2023·四川·二模
知识点:PCR扩增的原理与过程基因表达载体的构建发酵工程的应用 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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人血清白蛋白(HSA)是血浆蛋白的主要成分,具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。科学家利用转基因技术获得转入HSA基因的大肠杆菌,通过发酵工程,实现HSA的大量生产,图1表示HSA基因,图2表示所用质粒的结构,回答下列问题:
   
(1)已知DNA复制时,子链延伸的方向是从5'→3'。若要扩增出HSA基因并用于表达载体的构建,应选择的引物是_________,其作用是_________
(2)由图2可知,在构建基因表达载体时,最好选用的限制酶是_________。可在图1中所选两种引物前的序列中添加相应酶切位点后进行PCR,至少复制_________次即可得到含所需酶切位点的HSA基因。
(3)将重组质粒导入大肠杆菌前,需用钙离子处理大肠杆菌,使其处于一种_________的生理状态,便于重组质粒的导入。
(4)将重组质粒导入大肠杆菌,在添加了氨苄青霉素的培养基中培养得到了4个大肠杆菌菌落,进行进一步检测,检测结果如表所示,1号、2号、3号菌落均需要舍弃,理由分别是_________
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DNA-DNA分子杂交-+++
RNA-DNA分子杂交-+-+
抗原—抗体杂交---+
注:“+”表示阳性,“-”表示阴性。
(5)若利用转基因动物通过分泌的乳汁来生产HSA,可将药用蛋白基因与_________等调控组件重组在一起,通过_________的方法,导入哺乳动物的_________中,然后使其生长发育成转基因动物。

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