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非选择题-解答题 适中0.65 引用1 组卷332
血凝素基因(HA)编码的血凝素是构成流感病毒囊膜纤突的主要成分。成熟的血凝素包含HA1和HA2两个亚单位,其中HA1含有病毒与受体相互作用的位点。IgGFc基因片段(长度为717bp)编码人IgG抗体中的一段小肽,常作为融合蛋白标签。蛋白质分泌依赖于信号肽的引导,本研究中用信号肽Ⅱ-2SS代替HA自身信号肽,科研人员尝试构建IL-2SS/HA1/IgG Fc融合蛋白表达载体,并导入大肠杆菌表达和分泌,请回答:

(1)流感病毒囊膜主要由_____________组成,囊膜上血凝素的合成场所在_____________
(2)本实验用信号肽Ⅱ-2SS代替HA自身信号肽有利于_____________,PCR扩增目的基因时应该选择图中引物_____________
(3)设计引物时,引物序列的长度及_____________直接影响着PCR过程中退火温度的设定。
(4)应选择限制酶_____________来切割质粒A,然后直接将PCR产物与质粒A混合,同时加入_____________酶,使得目的基因与质粒A相连。若目的基因与质粒A正向连接,用BamHI和SacI同时切割重组质粒,完全酶切后的产物的长度约为_____________bp。
(5)融合蛋白中的标签蛋白有利于目的蛋白的分离和纯化,基因工程生产HA1作为疫苗时,选择人IgGFc作为标签的优点还有_____________
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知识点:细胞器之间的协调配合PCR扩增的原理与过程基因表达载体的构建免疫系统的功能 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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近年来,基因工程、蛋白质工程等的广泛应用给发酵工程制药领域的发展注入了强劲动力。人们可以采用基因工程的方法,将药物蛋白基因转移到微生物中,获得具有某种药物生产能力的微生物。科研人员尝试构建S/H/G融合蛋白表达载体,并导入受体细胞表达和分泌。H为目的基因编码的蛋白质,蛋白质分泌依赖于信号肽的引导,用信号肽S代替H自身信号肽有利于蛋白质的分泌,G基因片段(长度为717bp)编码的一段小肽常作为融合蛋白标签。请回答下列问题:
   
(1)在基因工程中作为载体的质粒应具备的基本条件有_________(至少答出2点)。为了使目的基因______需要构建基因表达载体,构建基因表达载体时,为了满足需要,会在载体中人工构建诱导型启动子,当诱导物存在时可以激活或抑制_________
(2)利用PCR扩增目的基因时,应选择图中的引物_________;若目的基因经过PCR扩增n次,需要的引物数量至少是_________。PCR的产物,常采用_________法鉴定。
(3)要构建SHG融合蛋白表达载体,应选择图中限制酶_________来切割质粒。若目的基因与质粒按图示方向正向连接,用BamHI和SacI时切割重组后的基因表达载体,完全酶切后的产物的长度约为_________bp。
(4)该基因工程中的受体细胞无任何抗生素抗性,某同学用只含有氨苄青霉素的培养基筛选导入重组质粒的受体细胞,这样处理不能成功的原因是_________

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