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非选择题-解答题 适中0.65 引用1 组卷236
为研究干旱胁迫基因LEA和VOC对甘蓝型油菜油脂的积累机制,科研人员构建了两个基因表达载体。其中基因LEA与荧光素酶基因(Luc) 构建成基因表达载体甲,基因VOC和标记基因构建成基因表达载体乙,相关序列及酶切位点如图所示。箭头表示转录方向。

(1)利用PCR扩增LEA基因时,需要在引物的______(填“3’端”或“5’端”)添加限制酶识别序列,添加序列对应的限制酶是________, 选择上述酶的依据是_______
(2)为了构建基因表达载体甲,依据图中已知碱基序列,在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为____
(3)乙酰-CoA羧化酶基因(AC)是油脂合成过程的关键酶基因,甘油三酯酯酶基因( ATGL)是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B,在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物,分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平,结果如下图。

①在分子水平上,用________方法检测AC酶和ATGL酶的含量可得到上述结果。
②基于以上研究,干旱胁迫基因LEA和VOC在甘蓝型油菜油脂积累中的机制是____
2023·湖南岳阳·模拟预测
知识点:PCR扩增的原理与过程目的基因的检测与鉴定 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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为研究干旱胁迫基因LEA和VOC对甘蓝型油菜油脂的积累机制,科研人员构建了两个基因表达载体。其中基因LEA与荧光素酶基因(Luc)构建成基因表达载体甲,基因VOC和标记基因构建成基因表达载体乙,相关序列及酶切位点如图所示。箭头表示转录方向。

(1)利用PCR扩增LEA基因时,需要在引物的____________(填“3'端”或“5'端”)添加限制酶识别序列,添加序列对应的限制酶是____________,若产物中除了目的基因外有其他DNA片段存在,从引物角度考虑,原因可能是___________
(2)为了构建基因表达载体甲,依据图中已知碱基序列,在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为5'-___________-3'和5'____________-3'。基因表达载体中启动子的作用是____________
(3)常用农杆菌转化法将目的基因导入油菜受体细胞,依据农杆菌的侵染特点,目的基因将插入Ti质粒的_______上,经过转化作用,进入油菜细胞,并将其插入_____________,从而使其得以维持稳定和表达。
(4)乙酰-CoA羧化酶基因(AC)是油脂合成过程的关键酶基因,甘油三酯酯酶基因(ATGL)是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B,在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物,分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平,结果如下图。

正常植株转基因A植株转基因B植株
AC酶

ATGL酶

①在分子水平上,用____________方法检测AC酶和ATGL酶的含量可得到上述表格结果。
②基于以上研究,干旱胁迫基因LEA和VOC在甘蓝型油菜油脂积累中的机制是___________
烟草易受烟草花叶病毒(TMV)感染而大幅度减产。绞股蓝(一种植物)细胞中含有抗TMV基因,能抵抗TMV感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV烟草。
(1)下表是相关研究中的一些步骤,请结合所学基因工程知识完成以下表格(在答题卡上的①~⑥处填写)

实验步骤

方法要点

筛选合适的目的基因

从绞股蓝细胞中提取总RNA,通过逆转录过程获得DNA;再通过①__________技术扩增出大量目的基因片段

__________

将目的基因插入Ti质粒

转化细胞

常用③__________方法将重组质粒导入受体细胞

__________

在含有卡那霉素的培养基上培养受体细胞

获得再生植株

运用⑤__________技术培育

转基因植株分析

从分子水平与⑥__________水平,上对转基因植株进行检测与鉴定


(2)为研究干旱胁迫基因LEA和VOC对绞股蓝油脂的积累机制,科研人员构建了两个基因表达载体。其中基因LEA与荧光素酶基因(Luc) 构建成基因表达载体甲,基因VOC和标记基因构建成基因表达载体乙,相关序列及酶切位点如图所示。箭头表示转录方向。

① 利用PCR扩增LEA基因时,需要在引物的______________(填“3’端”或“5’端”)添加限制酶识别序列,添加序列对应的限制酶是____________
② 为了构建基因表达载体甲,依据图中已知碱基序列,在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为_______扩增____________代后会得到等长的8条DNA片段。
③ 乙酰-CoA羧化酶基因(AC)是油脂合成过程的关键酶基因,甘油三酯酯酶基因( ATGL)是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B,在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物,分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平,结果如下图。

Ⅰ在分子水平上,用___________________________方法检测AC酶和ATGL酶的含量可得到上述结果。
Ⅱ基于以上研究,干旱胁迫基因LEA和VOC在绞股蓝油脂积累中的机制是_____________
烟草易受烟草花叶病毒(TMV)感染而大幅度减产。绞股蓝(一种植物)细胞中含有抗TMV基因,能抵抗TMV感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV烟草。
(1)下表是相关研究中的一些步骤,请结合所学基因工程知识完成以下表格。
实验步骤方法要点
筛选合适的目的基因从绞股蓝细胞中提取总RNA,通过逆转录过程获得DNA;再通过①_____________技术扩增出大量目的基因片段
________将目的基因插入Ti质粒
转化细胞常用③__________方法将重组质粒导入受体细胞
筛选转基因细胞在含有卡那霉素的培养基上培养受体细胞
获得再生植株运用植物组织培养技术培育
转基因植株分析从分子水平与④____________水平上,对转基因植株进行检测与鉴定
部分载体结构:       LEA基因序列:

   

(2)为研究干旱胁迫基因LEA和VOC对绞股蓝油脂的积累机制,科研人员构建了两个基因表达载体。其中基因LEA与荧光素酶基因(Luc)构建成基因表达载体甲,基因VOC和标记基因构建成基因表达载体乙,相关序列及酶切位点如图所示。箭头表示转录方向。
①利用PCR扩增LEA基因时,需要在引物的__________(填“3’端”或“5’端”)添加限制酶识别序列,且常在两条引物上设计加入不同的限制酶切位点,添加序列对应的限制酶是______
②为了构建基因表达载体甲,依据图中已知碱基序列,在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为______________________
③乙酰—CoA羧化酶基因(AC)是油脂合成过程的关键酶基因,甘油三酯酯酶基因(ATGL)是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B,在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物,分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平,结果如下图。
在分子水平上,用__________方法检测AC酶和ATGL酶的含量可得到如下结果。


正常植株

转基因A植株

转基因B植株

AC酶

   

   

   

ATGL酶

   

   

   

④基于以上研究,干旱胁迫基因LEA和VOC在绞股蓝油脂积累中的机制是:在干旱胁迫的环境下,________________

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