非选择题-解答题 适中0.65 引用2 组卷218
金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在于动植物中具有金属结合能力的蛋白质,决定该蛋白质合成的基因结构如图1所示,其中A链为编码链、B链为模板链。科研人员利用图2所示质粒构建枣树的MT基因重组DNA分子并导入大肠杆菌细胞,获得对重金属镉(Cd)具有吸附能力和耐受能力的MT工程菌。(注:XhoI、KpnI、PstI为不同限制酶的识别位点:LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以催化无色物质X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色;ampr基因 为氨苄青霉素抗性基因。)回答下列问题:
(1)目的基因的筛选与获取提取枣树细胞的___ ,经逆转录获得 cDNA:为了使PCR扩增后的产物按照正确的方向与已被酶切的载体连接,克隆MT基因时应选择的引物组合是_____ ,并在其_____ (填“5'”或“3'”)末端分别添加限制酶___ 的识别序列。
(2)基因表达载体的构建启动子是___ 识别并结合的部位;基因工程中构建用于原核生物的表达载体时,常用的启动子不包括以下哪一项___ 。
A.噬菌体基因启动子
B.乳酸菌基因启动子
C.大肠杆菌基因启动子
D.枣树MT基因启动子
(3)导入、筛选和鉴定MT工程菌①将得到的混合物导入到用___ 处理的大肠杆菌。
②将菌液稀释并涂布在含X-gal和氨苄青霉素的培养基上进行培养后,随机挑取____ 的单菌落可获得MT工程菌。
③欲进一步对MT工程菌进行鉴定,可将挑取出的MT工程菌与___ 分别接种至含___ 的LB液体培养基中,置于恒温培养箱中培养,适宜时间后检测菌种数量。
(4)扩大菌种将MT工程菌接种至发酵罐内进行扩增,培养过程中可定期取样并使用___ 对菌体进行直接计数,以评估增殖情况。发酵结束后,采用___ (答出1项即可)等方法获得所需的发酵产品。
(1)目的基因的筛选与获取提取枣树细胞的
(2)基因表达载体的构建启动子是
A.噬菌体基因启动子
B.乳酸菌基因启动子
C.大肠杆菌基因启动子
D.枣树MT基因启动子
(3)导入、筛选和鉴定MT工程菌①将得到的混合物导入到用
②将菌液稀释并涂布在含X-gal和氨苄青霉素的培养基上进行培养后,随机挑取
③欲进一步对MT工程菌进行鉴定,可将挑取出的MT工程菌与
(4)扩大菌种将MT工程菌接种至发酵罐内进行扩增,培养过程中可定期取样并使用
22-23高二下·辽宁葫芦岛·阶段练习
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