非选择题-解答题 较难0.4 引用1 组卷523
研究人员以拟南芥为实验材料开展遗传研究时,发现拟南芥细胞中存在着9—顺式—环氧类胡萝卜素双加氧酶(NCED)基因、转录因子NGA1基因等与抗旱性状相关的基因,将上述基因通过基因工程转入水稻细胞内,获得了抗旱性较强的水稻新品种。
(1)为探索与干旱诱导相关的基因,研究人员做了如下探究:将野生型拟南芥进行干旱处理,发现叶片中脱落酸(ABA)含量增高,气孔开度减小,水分散失减少。继续探究发现,NCED是ABA合成过程中的关键酶,NCED基因超量表达的拟南芥抗旱性明显增强。已知NGA1基因的表达产物可作用于NCED基因的启动子,NGA1基因敲除突变体植株对干旱敏感。推测NGA1基因参与植物抗旱的机理是______ 。
(2)为实现在不破坏拟南芥细胞结构的基础上通过PCR技术原位扩增NCED基因,科研人员先通过化学固定保持细胞的形态结构,然后借助膜结构的通透性,使_______ (PCR扩增时需要的成分)进入细胞核中,以NCED基因为模板进行原位扩增。若要通过原位扩增的方式获得大量NCED基因对应的cDNA,则应在固定细胞形态结构后,先使DNA酶进入细胞核中发挥作用,然后以NCED基因转录出的mRNA为模板合成cDNA,再进一步扩增获得大量cDNA.上述过程中先使用DNA酶处理的原因是_______ 。
(3)用农杆菌转化法将NCED基因转入水稻细胞时,需先将NCED基因插入到______ ,该过程需用两种限制酶同时切割NCED基因和运载体,目的是______ 。将重组质粒转入农杆菌,再将含重组质粒的农杆菌与取自新鲜水稻的圆形小叶片共培养,控制培养基中______ (填激素)的使用比例,通过植物组织培养获得多株转基因水稻。欲通过对照实验的方法在个体水平上判断转基因技术成功与否,实验设计思路是______ 。
(1)为探索与干旱诱导相关的基因,研究人员做了如下探究:将野生型拟南芥进行干旱处理,发现叶片中脱落酸(ABA)含量增高,气孔开度减小,水分散失减少。继续探究发现,NCED是ABA合成过程中的关键酶,NCED基因超量表达的拟南芥抗旱性明显增强。已知NGA1基因的表达产物可作用于NCED基因的启动子,NGA1基因敲除突变体植株对干旱敏感。推测NGA1基因参与植物抗旱的机理是
(2)为实现在不破坏拟南芥细胞结构的基础上通过PCR技术原位扩增NCED基因,科研人员先通过化学固定保持细胞的形态结构,然后借助膜结构的通透性,使
(3)用农杆菌转化法将NCED基因转入水稻细胞时,需先将NCED基因插入到
2023·山东威海·一模
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拟南芥(2N=10)属于十字花科植物,自花传粉,被誉为“植物界的果蝇”,广泛应用于植物遗传学研究。拟南芥细胞中存在某种转录因子能够明显提高其他基因的表达水平。研究人员将从拟南芥细胞中获取的转录因子转移到大豆细胞内,并使其过量表达,发现大豆中油酸和亚油酸的含量显著提高。图中限制酶EcoRⅤ的酶切位点为-GAT↓ATC-。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/18/a29ede8e-d101-4ba1-a110-0d9f7aabc47a.png?resizew=628)
(1)质粒P0具有氨苄青霉素抗性基因(ampr)和四环素抗性基因(tetr),对其进行切割时应该注意_______________________________________________________________________ ,以便筛选重组质粒。研究人员利用限制酶EcoRⅤ对载体进行处理后________ (填“能”或“不能”)与目的基因片段直接相连。用限制酶和T4DNA连接酶构建基因表达载体时,研究人员常选用能产生黏性末端的限制酶,你认为这样做的理由是____________________________________________________ 。
(2)P3质粒导入受体细胞通常使用农杆菌转化法,若受体细胞能够表现氨苄青霉素抗性,能否说明目的基因已成功导入受体细胞,并说出理由:_______________________________ 。
(3)受体细胞能够培育出转基因大豆植株的原因是____________________________ 。
(4)为了获得大量的目的基因,可以采用PCR技术进行扩增,PCR技术依据的原理是__________________ 。PCR过程每次循环分为3步,其中温度最低的一步是______ 。PCR扩增完成后,常采用____________________________ 来鉴定PCR的产物。
(5)某实验利用PCR技术获取目的基因,实验结果显示除目的基因条带(引物与模板完全配对)外,还有2条非特异条带(引物和模板不完全配对)。为了减少反应非特异条带的产生,以下措施中有效的是_______________
(6)利用 PCR 技术,在引物的某个特定位点引入一个或多个不能与目的基因配对的碱基,就可以在目的基因中带来定点突变,据此获得的目的基因再经表达、纯化获得蛋白质,该过程属于____________________ (填工程技术)的范畴。
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(1)质粒P0具有氨苄青霉素抗性基因(ampr)和四环素抗性基因(tetr),对其进行切割时应该注意
(2)P3质粒导入受体细胞通常使用农杆菌转化法,若受体细胞能够表现氨苄青霉素抗性,能否说明目的基因已成功导入受体细胞,并说出理由:
(3)受体细胞能够培育出转基因大豆植株的原因是
(4)为了获得大量的目的基因,可以采用PCR技术进行扩增,PCR技术依据的原理是
(5)某实验利用PCR技术获取目的基因,实验结果显示除目的基因条带(引物与模板完全配对)外,还有2条非特异条带(引物和模板不完全配对)。为了减少反应非特异条带的产生,以下措施中有效的是_______________
A.增加模板DNA的量 |
B.延长热变性的时间 |
C.延长延伸的时间 |
D.提高复性的温度 |
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