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非选择题-实验题 适中0.65 引用3 组卷182
实验小组将启动子rd29A和拟南芥植株的抗寒基因DREBI相连后导入大豆,获得了抗寒转基因植株,下图1表示构建重组质粒时所用的载体,已知Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为四种不同的限制酶,其各自识别的DNA序列如下表所示。回答下列问题:

限制酶

识别序列及切割位点


GGATCC
CCTAGG


TGTACA
ACATGT

GTAC

CATG


AAGCTT
TTCGAA


(1)构建重组质粒过程中最好同时使用__________两种限制酶切割质粒,原因是____________________
(2)欲将重组质粒导入大豆的愈伤组织细胞中,一般使用__________法导入。培养基中需要加入__________(填“四环素”或“氨苄青霉素”),其作用是____________________
(3)实验小组进一步研究了不同的温度诱导下转基因植株中抗寒基因DREBI的表达情况,实验结果如图2所示:

从分子水平上检测转基因大豆中DREBI基因的表达产物,可采用的方法是__________。试根据检测结果阐述目的植株导入DREBI基因的优点在于____________________
22-23高三上·河南·期末
知识点:基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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图1为胰岛素基因结构与引物位置示意图,图2为pBR322质粒的结构示意图,图中EcoR I、Sma I、BamH I和HindIII为限制酶,箭头或线段所指位点为对应酶切位点。研究人员欲用此质粒构建胰岛素基因的表达载体,培养能产生人胰岛素的大肠杆菌。请回答下列相关问题:

(1)在构建基因表达载体时,选择____________________分别切割质粒和目的基因,使用两种限制酶切割产生不同的黏性末端,可以防止________________________
(2)若要进行图1中胰岛素基因的扩增常采用__________技术,DNA新链的合成方向是__________,扩增过程中若选择引物3和6,则导致扩增所得的DNA片段_____,故应该选择的引物为__________
(3)成功构建的基因表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是_________________________________,若利用酵母菌作受体细胞生产胰岛素等分泌蛋白,与大肠杆菌相比,酵母菌的优势有____________________________。若要检测导入酵母菌的胰岛素基因是否成功表达,常用____________________技术。
(4)为筛选出含有重组质粒的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到A、B、C三类菌落,其生长情况如下表(“+”代表生长,“-”代表不生长)。根据表中结果判断,应选择的菌落是__________(填表中字母)类,另外两类菌落质粒导入情况分别是________________________________________

菌落类型


平板类型

A

B

C

无抗生素

+

+

+

氨苄青霉素

+

+

-

四环素

+

-

-

氨苄青霉素+四环素

+

-

-


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