异养反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸盐转化为氮（2NO3-+10e-+12H+→…→N2O→N2），该细菌在处理工业污水、治理水体富营养化中具有重要作用。为了筛选-组卷网

非选择题-解答题适中0.65 引用4 组卷270

异养反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸盐转化为氮（2NO₃^-+10e^-+12H⁺→…→N₂O→N₂），该细菌在处理工业污水、治理水体富营养化中具有重要作用。为了筛选出耐高温（42℃）的反硝化细菌菌株，用于提升较高温度的工业污水的脱氮效率，研究人员按照下图的中实验流程进行菌种的筛选研究。回答下列问题：

注：BTB培养基初始pH=6.8；BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色
(1)梯度稀释的目的是________。在试管中加入________对样品进行梯度稀释。
(2)制备BTB培养基时，以________为唯一氨源。稀释后的污泥样品可用________（填方法）接种到BTB培养基上，放在________环境中培养2～3天后，挑选显________色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。
(3)将纯菌株接种在液体培养基上培养一段时间，若在培养瓶顶空检测到N₂O，即可鉴定为目的菌，而不能依据培养液中硝酸盐的浓度降低来鉴定目的菌，理由是_____________________。

22-23高三上·河南·期末

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知识点：培养基的类型及其应用无菌技术微生物的接种方法其他微生物的分离与计数答案解析【答案】很抱歉，登录后才可免费查看答案和解析！

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反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸盐逐步转化为氮气（2NO₃^-+10e^-+12H⁺→．．．→N₂O→N₂），在处理工业污水、治理水体富养化中具有重要作用。科研人员想从污水处理厂的活性污泥中筛选分离出耐高温（42℃）的反硝化细菌（目的菌），用于提升温度较高的工业污水的脱氮效率，部分流程如下：

注：BTB培养基初始pH=6．8，BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件为蓝色。
(1)BTB培养基应以_________为唯一氮源。配制培养基时，培养基的灭菌应该在调pH_________（填“之前”或“之后”）。
(2)将污泥样品梯度稀释后，使用_______（填工具）将样液均匀涂布在BTB培养基上，接种后的平板在培养时放置情况应选择图2中_________（填“A”或“B”）方式。
(3)将上述接种后的培养基放在无氧环境中培养2-3天后，最好挑选培养基显_________色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。为进一步鉴定目的菌，将上述分离获得的纯菌株接种在液体培养基上培养一段时间，若在培养瓶顶部空间检测到N₂O，即可鉴定为目的菌。不能依据培养液中硝酸盐的浓度变低来鉴定目的菌，其原因是__________。
(4)为了计数目的菌的数量，一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为10⁶的污泥样液0.1mL，培养后菌落数分别为155、160、176、149个，则每毫升原污泥样液中目的菌的数量约为________。该种计数方法可推测样品中活菌数的原因是_________。

反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸盐转化为氮气（2NO₃^—+10e^-+12H⁺→。。。→N₂O→N₂），在处理工业污水、治理水体富养化中具有重要作用。科研人员想从一污水处理厂的活性污泥中筛选分离出耐高温（42℃）的反硝化细菌（目的菌），用于提升温度较高的工业污水的脱氮效率，具体流程如下：

注：BTB培养基初始pH=6.8.BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件为蓝色。
(1)BTB培养基以______________为唯一氮源，使用________________法进行灭菌。待平板凝固后，应倒置放在超净台上，目的是__________________________。
(2)将污泥样品梯度稀释后，使用_________________将样液均匀涂布在BTB培养基上，放在_________环境中培养2-3天后，挑选显______色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。
(3)将纯菌株接种在液体培养基上培养一段时间，若在培养瓶顶部检测到N₂O，即可鉴定为目的菌。不能依据培养液中硝酸盐的浓度变低来鉴定目的菌，原因是___________。
(4)C/N（碳氮含量比）对反硝化效率有一定的影响。科研人员测得不同C/N条件下目的菌对硝酸盐的去除率，结果如图所示：

科研人员提出，在利用目的菌株处理工业污水时，需要适当向污水中投放少量淀粉，据图分析这样做的主要目的是____________。

反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸盐转化为氮气（2NO

＋10e^﹣＋12H^﹢→…→N₂O→N₂），在处理工业污水、治理水体富养化中具有重要作用。科研人员想从一污水处理厂的活性污泥中筛选分离出耐高温（42℃）的反硝化细菌（目的菌），用于提升温度较高的工业污水的脱氮效率，具体流程如下：

注：BTB培养基初始pH＝6.8，BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件为蓝色。
(1)BTB培养基以_________________为唯一氮源，使用_________________法进行灭菌。待平板凝固后，应倒置放在超净台上，目的是_____________。
(2)将污泥样品梯度稀释后，使用_________________（填工具）将样液均匀涂布在BTB培养基上，放在_________________环境中培养2－3天后，挑选显_________________色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。
(3)将纯菌株接种在液体培养基上培养一段时间，若在培养瓶顶部检测到N₂O，即可鉴定为目的菌。不能依据培养液中硝酸盐的浓度变低来鉴定目的菌，原因是_______________。
(4)为计数微生物的数量，一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为10⁶的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为155、160、176、149，则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为______。

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