非选择题-解答题 适中0.65 引用1 组卷211
烟草易受烟草花叶病毒（TMV）感染而大幅度减产。绞股蓝（一种植物）细胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMV感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV烟草。
(1)下表是相关研究中的一些步骤，请结合所学基因工程知识完成以下表格。
(2)如图为经人工改造后的某种Ti质粒，该质粒中部分片段序列及部分限制酶识别序列已标出。据此图完成Ⅰ~Ⅲ题：
Ⅰ、步骤②是整个基因工程操作的核心，为了将目的基因插入Ti质粒，需要用限制酶和_____ 酶。为了避免_____ ，一般采用双酶切法，使切开的DNA片段具有两个不同的末端。
Ⅱ、在用PCR技术获取目的基因时，为了方便后续的剪切和连接，设计引物时会将限制酶识别序列加在目的基因序列的两端，应选用下列_____ （填序号）作为PCR引物。
Ⅲ、穿梭载体是指同时可在两种不同生物中稳定存在的载体，因该载体含有两种生物不同的复制原点。Ti质粒即为一种穿梭载体，质粒上除启动子、终止子、多个限制酶酶切位点和标记基因外，还有_____ 的复制原点。
(1)下表是相关研究中的一些步骤，请结合所学基因工程知识完成以下表格。
| 实验步骤 | 方法要点 |
| 获取目的基因 | 从绞股蓝细胞中提取RNA，通过① |
| ② | 将目的基因插入Ti质检 |
| 转化细胞 | 常用③ |
| ④ | 在含有卡那霉素的培养基上培养受体细胞 |
| 获得再生植株 | 运用⑤ |
| 转基因植株分析 | 从分子水平与⑥ |
(2)如图为经人工改造后的某种Ti质粒，该质粒中部分片段序列及部分限制酶识别序列已标出。据此图完成Ⅰ~Ⅲ题：
Ⅰ、步骤②是整个基因工程操作的核心，为了将目的基因插入Ti质粒，需要用限制酶和
Ⅱ、在用PCR技术获取目的基因时，为了方便后续的剪切和连接，设计引物时会将限制酶识别序列加在目的基因序列的两端，应选用下列
Ⅲ、穿梭载体是指同时可在两种不同生物中稳定存在的载体，因该载体含有两种生物不同的复制原点。Ti质粒即为一种穿梭载体，质粒上除启动子、终止子、多个限制酶酶切位点和标记基因外，还有
21-22高二下·江苏连云港·期末
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烟草易受烟草花叶病毒（TMV）感染而大幅度减产。绞股蓝（一种植物）细胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMV感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV烟草。
(1)下表是相关研究中的一些步骤，请结合所学基因工程知识完成以下表格。
部分载体结构： LEA基因序列：
①利用PCR扩增LEA基因时，需要在引物的__________ （填“3’端”或“5’端”）添加限制酶识别序列，且常在两条引物上设计加入不同的限制酶切位点，添加序列对应的限制酶是______ 。
②为了构建基因表达载体甲，依据图中已知碱基序列，在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为______________________ 。
③乙酰—CoA羧化酶基因（AC）是油脂合成过程的关键酶基因，甘油三酯酯酶基因（ATGL）是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B，在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物，分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平，结果如下图。
在分子水平上，用__________ 方法检测AC酶和ATGL酶的含量可得到如下结果。
④基于以上研究，干旱胁迫基因LEA和VOC在绞股蓝油脂积累中的机制是：在干旱胁迫的环境下，_______ 、_________ 。
(1)下表是相关研究中的一些步骤，请结合所学基因工程知识完成以下表格。
| 实验步骤 | 方法要点 |
| 筛选合适的目的基因 | 从绞股蓝细胞中提取总RNA，通过逆转录过程获得DNA；再通过① |
| ② | 将目的基因插入Ti质粒 |
| 转化细胞 | 常用③ |
| 筛选转基因细胞 | 在含有卡那霉素的培养基上培养受体细胞 |
| 获得再生植株 | 运用植物组织培养技术培育 |
| 转基因植株分析 | 从分子水平与④ |
①利用PCR扩增LEA基因时，需要在引物的
②为了构建基因表达载体甲，依据图中已知碱基序列，在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为
③乙酰—CoA羧化酶基因（AC）是油脂合成过程的关键酶基因，甘油三酯酯酶基因（ATGL）是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B，在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物，分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平，结果如下图。
在分子水平上，用
正常植株 | 转基因A植株 | 转基因B植株 | |
AC酶 |
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ATGL酶 |
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烟草易受烟草花叶病毒（TMV）感染而大幅度减产。绞股蓝（一种植物）细胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMV感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV烟草。
(1)下表是相关研究中的一些步骤，请结合所学基因工程知识完成以下表格（在答题卡上的①~⑥处填写）
(2)为研究干旱胁迫基因LEA和VOC对绞股蓝油脂的积累机制，科研人员构建了两个基因表达载体。其中基因LEA与荧光素酶基因（Luc） 构建成基因表达载体甲，基因VOC和标记基因构建成基因表达载体乙，相关序列及酶切位点如图所示。箭头表示转录方向。
① 利用PCR扩增LEA基因时，需要在引物的______________ （填“3’端”或“5’端”）添加限制酶识别序列，添加序列对应的限制酶是____________ 。
② 为了构建基因表达载体甲，依据图中已知碱基序列，在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为_______ 扩增____________ 代后会得到等长的8条DNA片段。
③ 乙酰-CoA羧化酶基因（AC）是油脂合成过程的关键酶基因，甘油三酯酯酶基因（ ATGL）是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B，在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物，分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平，结果如下图。
Ⅰ在分子水平上，用___________________________ 方法检测AC酶和ATGL酶的含量可得到上述结果。
Ⅱ基于以上研究，干旱胁迫基因LEA和VOC在绞股蓝油脂积累中的机制是_____________ 。
(1)下表是相关研究中的一些步骤，请结合所学基因工程知识完成以下表格（在答题卡上的①~⑥处填写）
实验步骤 | 方法要点 |
筛选合适的目的基因 | 从绞股蓝细胞中提取总RNA，通过逆转录过程获得DNA；再通过① |
② | 将目的基因插入Ti质粒 |
转化细胞 | 常用③ |
④ | 在含有卡那霉素的培养基上培养受体细胞 |
获得再生植株 | 运用⑤ |
转基因植株分析 | 从分子水平与⑥ |
(2)为研究干旱胁迫基因LEA和VOC对绞股蓝油脂的积累机制，科研人员构建了两个基因表达载体。其中基因LEA与荧光素酶基因（Luc） 构建成基因表达载体甲，基因VOC和标记基因构建成基因表达载体乙，相关序列及酶切位点如图所示。箭头表示转录方向。
① 利用PCR扩增LEA基因时，需要在引物的
② 为了构建基因表达载体甲，依据图中已知碱基序列，在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为
③ 乙酰-CoA羧化酶基因（AC）是油脂合成过程的关键酶基因，甘油三酯酯酶基因（ ATGL）是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B，在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物，分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平，结果如下图。
Ⅰ在分子水平上，用
Ⅱ基于以上研究，干旱胁迫基因LEA和VOC在绞股蓝油脂积累中的机制是
烟草易受烟草花叶病毒（TMV）感染而大幅度减产。绞股蓝细胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMV感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV烟草。
(1)下表是相关研究中的一些步骤，请结合所学基因工程知识完成以下表格。
(2)为研究干旱胁迫基因LEA和VOC对绞股蓝油脂的积累机制，科研人员构建了两个基因表达载体。其中基因LEA与荧光素酶基因（Luc）构建成基因表达载体甲，基因VOC和标记基因构建成基因表达载体乙，相关序列及酶切位点如图所示。箭头表示转录方向。
① 利用PCR扩增LEA基因时，需要在一对引物的____ （3' 端、5'端）添加____ 两种限制酶识别序列。
② 为了构建基因表达载体甲，依据图中已知碱基序列，在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为5'-____ -3'和5'-____ -3'，扩增____ 代后会得到8个双链等长的LEA基因。
③ 乙酰-CoA羧化酶基因（AC）是油脂合成过程的关键酶基因，甘油三酯酯酶基因（ATGL）是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B，在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物，分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平，结果如下图。
Ⅰ.在分子水平上，用____ （技术）检测AC酶和ATGL酶的表达量可得到上述结果。
Ⅱ.基于以上研究，干旱胁迫基因LEA和VOC在绞股蓝油脂积累中的机制是__ 。
(1)下表是相关研究中的一些步骤，请结合所学基因工程知识完成以下表格。
实验步骤 | 方法要点 |
筛选合适的 目的基因 | 从绞股蓝细胞中提取总RNA，通过逆转录过程获得双链cDNA；然后再在① |
构建重组质粒 | 将抗TMV基因插入Ti质粒的T-DNA中 |
转化细胞 | 用② |
③ | 在含有卡那霉素的培养基上培养受体细胞 |
获得再生植株 | 运用④ |
转基因植株分析 | 从分子水平与个体水平对转基因植株进行检测与鉴定 |
(2)为研究干旱胁迫基因LEA和VOC对绞股蓝油脂的积累机制，科研人员构建了两个基因表达载体。其中基因LEA与荧光素酶基因（Luc）构建成基因表达载体甲，基因VOC和标记基因构建成基因表达载体乙，相关序列及酶切位点如图所示。箭头表示转录方向。
① 利用PCR扩增LEA基因时，需要在一对引物的
② 为了构建基因表达载体甲，依据图中已知碱基序列，在PCR扩增仪中加入的引物的碱基序列为5'-
③ 乙酰-CoA羧化酶基因（AC）是油脂合成过程的关键酶基因，甘油三酯酯酶基因（ATGL）是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入植物细胞培养成转基因植物A、B，在干旱胁迫的环境下培养两种转基因植物和正常植物，分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达水平，结果如下图。
Ⅰ.在分子水平上，用
Ⅱ.基于以上研究，干旱胁迫基因LEA和VOC在绞股蓝油脂积累中的机制是
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