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非选择题-解答题 较难0.4 引用1 组卷343
三氯生是一种抑菌物质,具有优异的贮存稳定性,可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。已知fabV(从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶)基因可以使大肠杆菌抵抗三氯生。

(1)通过PCR方法获取fabV基因时,Taq酶只能从__________________延伸DNA链,而不能从头开始合成DNA,因此需要先根据__________________设计两种特异性引物序列。反应体系的初始温度设置在90~95℃的目的是____________________
(2)在④步骤中,科研者需将大肠杆菌菌液利用稀释涂布平板法接种到加有三氯生的细菌培养基上,待菌落长成后,直接挑取菌落加入到PCR反应系统中进行基因鉴定。PCR过程中不需要先提取细菌DNA的原因是________________________________________________________________________________________
(3)某科研团队将可以受温度调控的基因插入上述选出的重组质粒中,构建了温度调控表达质粒(如图2)。其中C基因在低温下会抑制P1,R基因在高温下会抑制P2。如果将lacZ基因和GFP基因插入图2质粒中,使得最后表现为低温下只表达GFP蛋白,而高温下只表达lacZ蛋白。则lacZ基因插在_____________之间,GFP基因插在______________________之间。
21-22高三下·广东珠海·阶段练习
知识点:真核细胞与原核细胞的异同PCR扩增的原理与过程目的基因的获取基因表达载体的构建 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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三氯生是一种抑苗物质,可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。2021年某科研团队通过先筛选出一种对三氯生抵抗性较强的重组质粒,再将可以受温度调控的基因插入该质粒上,构建了温度调控表达质粒。

(1)图1中,步骤I需要的工具酶是____________;步骤II常用的方法是用____________处理使细菌成为感受态细胞;为达到步骤III预期的筛选目的,所用物质最可能为____________
(2)已知fabV基因(-A和-B代表从不同苗中获得)可以使大肠杆菌抵抗三氯生。在图中,fabV-A基因和fabV-B基因是____________(目的/标记)基因。
(3)利用从细菌中提取的DNA通过PCR技术获取fabV-A基因时,需要的特定酶是____________,该酶只能从____________延伸DNA链,而不能从头开始合成DNA,因此需要先根据____________设计两种特异性引物序列。
(4)为获得一种增强大肠杆菌对三氯生的抵抗作用效果较好的重组质粒,将含有不同质粒的大肠杆菌分别接种到相应培养基中。培养一段时间后,结果如图2,则适宜选作构建温度调控表达质粒的是____________

(5)科学家对上述选出质粒进行改造,获得了图3所示质粒。其中是启动子,可以启动转录;基因在低温下会抑制基因在高温下会抑制是终止子,可以终止转录。如果将lacZ基因和GFP基因插入图质粒中,使得最后表现为高温下只表达GFP蛋白,而低温下只表达lacZ蛋白。则以下说法正确的有____________
A.GFP基因插在R基因和终止子T1之间
B.基因插在R基因和终止子T1之间
C.GFP基因插在启动子P2和终止子T2
D.lacZ基因插在启动子P2和终止子T2之间
三氯生是一种抑苗物质,可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。2021年某科研团队通过先筛选出一种对三氯生抵抗性较强的重组质粒,再将可以受温度调控 的基因插入该质粒上,构建了温度调控表达质粒。
   
(1)图1中,步骤1需要的工具酶是______________;步骤Ⅱ常用的方法是用____________处理使细菌成为感受态细胞;为达到步骤Ⅲ预期的筛选目的,所用物质X最可能为___________________
(2)已知fabV基因(-A和-B代表从不同苗中获得)可以使大肠杆菌抵抗三氯生。在图中,fabV-A基因和 fabV-B基因是_____________(目的/标记)基因。
(3)利用从细菌中提取的DNA通过PCR技术获取fabV-A基因时,需要的特定酶是________。该酶只能从引物的________端延伸DNA链,而不能从头开始合成DNA,因此需要先根据_____设计两种特异性引物序列。
(4)为获得一种增强大肠杆菌对三氯生的抵抗作用效果较好的重组质粒,将含有不同质粒的大肠杆菌分别接种到相应培养基中。培养一段时间后,结果如图2,则适宜选作构建温度调控表达质粒的是_________

   
(5)科学家对上述选出质粒进行改造,获得了图3所示质粒。其中P1和P2是启动子,可以启动转录;C基因在低温下会抑制P1;R基因在高温下会抑制P2;T1和T2是终止子,可以终止转录。如果将lacZ基因和GFP基因插入图质粒中,使得最后表现为高温下只表达GFP蛋白,而低温下只表达lacZ蛋白。则以下说法正确的有              
A.GFP基因插在R基因和终止子T1之间
B.lacZ基因插在R基因和终止子T1之间
C.GFP基因插在启动子P2和终止子T2之间
D.lacZ基因插在启动子P2和终止子T2之间

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