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非选择题-解答题组 适中0.65 引用3 组卷509
回答下列(一)、(二)小题:
(一)葡萄柚汁多且营养丰富,在减肥、美容养颜、降低胆固醇、增强发质等方面都有功效,其鲜果和加工品都深受消费者喜爱。
(1)柚子皮富含果胶,欲从柚子皮上分离纯化高产果胶酶的菌种,可在超净台上用接种环刮取柚子皮(腐烂并长有霉菌)表面的菌体,用_________法将菌体接种到_________培养基上筛选纯化。
(2)以葡萄柚为原料采用混合菌发酵技术制作柚子醋的过程:葡萄柚去皮→榨汁→接种→果酒发酵→果醋发酵→柚子醋。发酵过程中接种的是_________菌,需提供的氧气条件是_________,影响其产物风味的因素除温度等环境因素外还有_________(至少写两点)。
(3)利用固定化细胞技术发酵效率更高,因为与固定化酶技术相比,该技术对酶活性的影响更小,原因是_________
(4)发酵结束后,发酵液常需进行_________处理,若滤液浑浊,可采取静置沉淀、加热或_________等物理方法获得澄清果醋。
(二)新冠疫情威胁着人类的生命健康,疫苗的研制及病毒的检测在疫情防控中起着重要作用。新冠病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原。我国研发的腺病毒载体疫苗已获批上市。

(5)HEK细胞是一种特殊的人胚胎肾源细胞,在该细胞中,质粒I和质粒Ⅱ可进行同源重组,形成含S蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒。对获得的重组腺病毒除用PCR检测S蛋白基因外,还需用_________方法检测S蛋白。
(6)使用非洲绿猴肾(Vero)细胞进行病毒培养扩增,然后将病毒灭活,再经过一系列处理得到灭活疫苗。
经灭活的病毒保留了抗原成分,能诱导机体产生免疫应答。
①非洲绿猴肾(Vero)细胞培养通常需在合成培养基中加入_________
②把新冠病毒毒株接种于Vero细胞培养液,在适宜条件下培养,细胞出现病变时收获_________(填“细胞培养液”或“Vero细胞”),纯化后灭活。
(7)若机体接种腺病毒载体疫苗前感染过腺病毒,可能会减弱疫苗的免疫效果,其原因是_________
(8)为能更早地在人群中发现病例,除核酸检测外,利用抗原检测试剂盒可居家自行检测。抗原检测试剂盒的制备:取新冠病毒免疫过的动物B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,经_________、克隆等途径获得单克隆抗体,该单抗作为_________用于病毒抗原检测试剂盒。抗原检测虽然快速,但是检出率不及核酸检测,原因是核酸检测有一个_________的过程,因此哪怕只有少量的病毒核酸也能被发现。
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知识点:果酒和果醋的制作流程及实验分析基因工程综合动物细胞融合与单克隆抗体的制备新型冠状病毒及相关 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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回答下列(一)、(二)小题:
(一)乙醇发酵不仅为工业生产提供大量原料,也为人类的生活提供了丰富的产品。
(1)酒精浓度过高会抑制酵母菌发酵,为选育高产酵母,应配制含____的固体培养基,将野生产酒酵母用____法接种并培养。经计数,选择耐受性较高的菌株,并不断处理、驯化、筛选获得。保藏时间较长的优良菌种在使用前,应先接种在新的斜面培养基培养,使酵母菌____
(2)因酵母菌不能直接利用淀粉,使用淀粉含量丰富的薯类、谷类为发酵原料时,需先加____使淀粉分解成单糖。在发酵的起始阶段,发酵罐会出现负压,原因是____
(3)整个发酵过程时间的长短,除与接种方式、发酵方式、糖化剂的种类及发酵温度等环境因素有关外,还与____(至少写两种)有关。为随时了解发酵状况,可定期取样,加入本尼迪特试剂显色,然后通过____法进行定量分析残余糖的含量。
(4)为提高酵母菌的利用率,可将酵母菌____处理,同时也有利于与发酵产物分离。
(二)由新冠病毒引起的新冠肺炎,目前正肆虐全球。腺病毒感染在人类中普遍存在,它是一种低致病性DNA病毒。利用基因工程生产的腺病毒载体疫苗是有效的新冠疫苗之一。
(1)经研究,新冠病毒(RNA病毒)表面的S蛋白具有抗原特性,可用____技术检测并分离。以S蛋白的氨基酸序列为基础合成相应RNA,再通过____法合成S蛋白基因。用该方法获取的目的基因两端缺少____,因此在酶切前,应通过一定技术进行添加,以便与腺病毒载体重组。
(2)用普通的人腺病毒作为载体,可能会削弱相应腺病毒载体诱导的免疫反应,原因是____
(3)为了提高疫苗的安全性,常采用复制缺陷型腺病毒为载体,目的是____
(4)若要制备新冠病毒单抗,将经S蛋白兔疫的小鼠脾细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合,再通过筛选及多次____,得到所需的杂交瘤细胞。经培养分离可获得新冠病毒单抗,用于____
构筑新冠病毒防线需要两种措施:一种是新冠病毒的检测,以阻断传播途径;另一种是新冠疫苗的研制,以增强人体免疫力。新冠病毒是RNA病毒,病毒的S蛋白(棘突蛋白)是决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白,可与宿主细胞的病毒受体结合。分析以下三种针对新冠病毒的疫苗和抗体研发方法,回答相关问题。
方法技术路线
腺病毒载体重组疫苗S蛋白基因→腺病毒基因表达载体→人体
基因工程疫苗S蛋白基因→基因表达载体→大肠杆菌→棘突蛋白→人体
单克隆抗体免疫小鼠的B淋巴细胞+骨髓瘤细胞→杂交瘤细胞→单克隆抗体
(1)可以用免疫学检测新冠病毒,以S蛋白作为抗原制备单克隆抗体生产快速检测新冠病毒的试剂盒。单克隆抗体制备过程中,第一次筛选是利用_____获得_____细胞,再经过克隆化培养和抗体检测,就可获得的能分泌所需抗体的细胞。
(2)腺病毒载体重组疫苗是将S蛋白基因重组到改造后无害的腺病毒内,导入人体,在体内产生S蛋白,刺激人体产生抗体。改造后的腺病毒载体应具备的条件是_____(至少答出两点)。
(3)培养腺病毒需要以人胚胎肾细胞293(HEK293细胞)为宿主细胞,培养HEK293细胞需提供基本条件:除营养物质外还需要加入_____等天然成分,_____的环境,且气体环境应设置为95%空气加5%CO2,适宜的温度、PH和渗透压。
(4)制备基因工程疫苗和腺病毒载体疫苗均需要获取S蛋白基因,获取过程是提取新冠病毒总RNA,在_____酶等的作用下合成DNA,再采用PCR技术选择性扩增出S蛋白基因。该技术的前提是要有一段已知S蛋白基因的核苷酸序列,以便据此设计出_____
(5)注射以上腺病毒载体疫苗后也难以使人类彻底摆脱新冠病毒,可能的原因有:_____(答出两点)。
阅读下列材料,完成下面小题
材料:S蛋白是新冠病毒(SARS-CoV-2)感染机体的关键组分,也是研制新冠疫苗的关键起点。疫苗有多种类型,如灭活疫苗、重组病毒疫苗、mRNA疫苗等。2021年2月25日,由中国工程院院士陈薇领衔研发的以腺病毒为载体的疫苗获准上市注册申请,为我国乃至世界预防新冠疫情又增加了一件利器。
【小题1】下图为陈薇团队以缺失E1等基因的人复制缺陷腺病毒(E1基因是腺病毒基因组复制的关键基因)为载体的新冠疫苗研制流程示意图。

请回答:
(1)科研人员将S蛋白基因经___________酶酶切后,再用___________酶处理,构建成质粒I。
(2)HEK细胞是一种特殊的人胚胎肾源细胞,在该细胞中,质粒Ⅰ和质粒Ⅱ可进行同源重组形成含S蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒。为保证上述重组腺病毒能够大量复制,HEK细胞应含有___________基因及其表达产物。对获得的重组腺病毒除用PCR检测S蛋白基因外,还需用___________的方法检测S蛋白。
(3)上图中将含S蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒进行扩大培养的操作是____________
(4)与复制型腺病毒相比,利用复制缺陷腺病毒为载体制备成的疫苗的优点是_____________
(5)在疫苗研制中,为进一步提高S蛋白的表达量,进而提升疫苗的免疫效果,可采用的措施有________
A.在培养液中加入耐高温的DNA聚合酶
B.在S蛋白基因前加入增强型启动子
C.适当提高S蛋白基因的mRNA的稳定性
D.在不改变S蛋白结构前提下,将稀有密码子替换为高频使用密码子
【小题2】疫苗从研制走向临床使用,需经动物实验和临床实验等多重检测,以保证其安全性和有效性。陈薇团队对上述复制缺陷重组腺病毒疫苗的特异性免疫反应及其保护效果进行评价。图1、2表示不同的接种剂量和接种方式对小鼠免疫的影响,图3表示接种不同剂量疫苗,14天后接种新冠病毒,72小时后检测小鼠肺组织的病毒含量。

请回答:
(1)IFNγ是一种能增强效应T细胞活力的淋巴因子,在免疫系统组成中,它与抗体均属于________。由图1、图2结果可知,该疫苗可诱导小鼠产生明显的________免疫和________免疫。
(2)图3实验中对照组的处理为_____,结果显示疫苗对感染小鼠有明显的保护作用。为了达到最大的保护效果,该疫苗最适合的接种方式和剂量为____
(3)临床实验结果显示,该疫苗注射后至少有六个月的保护期,请分析该疫苗能持续对接种者进行保护的原因。____
(4)有人认为,最近出现的变异新冠病毒有可能使该疫苗失去保护作用。你是否赞同他的观点?请说明理由。____

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