蜘蛛丝是自然界中机械性能最好的天然蛋白纤维，其强度高于制作防弹衣的凯夫拉纤维，有广泛的应用前景。但如何大量获取蜘蛛丝的问题一直难以解决。2018年8月，中科院分子植物科学卓越创新中心利用基因工程技术成功在家蚕丝腺和蚕茧中大量表达蜘蛛丝蛋白。回答下列问题：
(1)PCR是获取大量目的基因的一种方法，PCR反应体系的成分中有两种引物，在复性时引物会结合到互补DNA链，对两种引物的设计要求之一是：两种引物之间不能碱基互补配对，试分析原因_____________；从引物设计的角度考虑，如果目的基因两侧没有酶切位点，用PCR技术_____________（“可以”或“不可以”）为目的基因设置酶切位点。
(2)如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有_____________（填序号：①升高退火温度②降低退火温度③重新设计引物）。
(3)构建基因表达载体时（如图所示），需要在目的基因前后两端分别引入_____________的酶切位点，该方法比用同一种酶进行酶切的优势是_____________（答出一点即可）。

(4)研究人员发现若将蛛丝蛋白31号位的色氨酸替换为酪氨酸，蛛丝韧性可提高50%，因而设计了与蛛丝蛋白基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按如图方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛛丝蛋白基因。

①改良蛛丝蛋白的技术属于_____________工程。
②图中所示的4次PCR都涉及到引物的选择，其中PCR1选择的引物是_____________，PCR4选择的引物是_____________。（填A、B、C、D）