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非选择题-解答题 较难0.4 引用2 组卷343
三氯生是一种抑菌物质,可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。2021年某科研团队通过先筛选出一种对三氯生抵抗性较强的重组质粒,再将可以受温度调控的基因插入该质粒上,构建了温度调控表达质粒。

(1)图中步骤a是基因工程四个步骤之一,则步骤a为______________
(2)已知fabV基因(pa和pp代表从不同菌中获得)可以使大肠杆菌抵抗三氯生。在图中,fabV-pa基因和fabV-pp基因是_______(目的/标记)基因。
为获得一种增强大肠杆菌对三氯生的抵抗作用效果较好的重组质粒,将含有不同质粒的大肠杆菌分别接种到含三氯生或者不含三氯生的培养基中。培养一段时间后,结果如图。

(3)设置pF2组(无三氯生)和pF2组(含三氯生)的原因是____________
A.验证pF2质粒可以促进大肠杆菌生长
B.验证pF2质粒可以抑制大肠杆菌生长
C.验证三氯生对含pF2质粒的大肠杆菌生长无影响
D.验证三氯生可以抑制含pF2质粒的大肠杆菌生长
(4)结合图,说说哪种质粒会被用于构建温度调控表达,并说明理由。________________
科学家对上述选出质粒进行改造,获得了图所示质粒。其中P1和P2是启动子,可以启动转录;C基因在低温下会抑制P1;R基因在高温下会抑制P2;T1和T2是终止子,可以终止转录。

(5)如果将lacZ基因和GFP基因插入图质粒中,使得最后表现为低温下只表达GFP蛋白,而高温下只表达lacZ蛋白。则以下说法正确的有________
A.GFP基因插在R基因和终止子T1之间
B.lacZ基因插在R基因和终止子T1之间
C.GFP基因插在启动子P2和终止子T2之间
D.lacZ基因插在启动子P2和终止子T2之间
(6)如果仅将GFP(绿色荧光蛋白)基因插入图质粒,构建成一个新的重组质粒。利用该重组质粒进行基因工程,受体细胞为大肠杆菌。那么,在筛选含有目的基因的受体细胞时,如何判断是否成功?(不考虑温度因素)____________________________________
22-23高三上·上海徐汇·期末
知识点:目的基因的获取基因表达载体的构建目的基因的检测与鉴定基因工程的操作程序综合 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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三氯生是一种抑苗物质,可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。2021年某科研团队通过先筛选出一种对三氯生抵抗性较强的重组质粒,再将可以受温度调控的基因插入该质粒上,构建了温度调控表达质粒。

(1)图1中,步骤I需要的工具酶是____________;步骤II常用的方法是用____________处理使细菌成为感受态细胞;为达到步骤III预期的筛选目的,所用物质最可能为____________
(2)已知fabV基因(-A和-B代表从不同苗中获得)可以使大肠杆菌抵抗三氯生。在图中,fabV-A基因和fabV-B基因是____________(目的/标记)基因。
(3)利用从细菌中提取的DNA通过PCR技术获取fabV-A基因时,需要的特定酶是____________,该酶只能从____________延伸DNA链,而不能从头开始合成DNA,因此需要先根据____________设计两种特异性引物序列。
(4)为获得一种增强大肠杆菌对三氯生的抵抗作用效果较好的重组质粒,将含有不同质粒的大肠杆菌分别接种到相应培养基中。培养一段时间后,结果如图2,则适宜选作构建温度调控表达质粒的是____________

(5)科学家对上述选出质粒进行改造,获得了图3所示质粒。其中是启动子,可以启动转录;基因在低温下会抑制基因在高温下会抑制是终止子,可以终止转录。如果将lacZ基因和GFP基因插入图质粒中,使得最后表现为高温下只表达GFP蛋白,而低温下只表达lacZ蛋白。则以下说法正确的有____________
A.GFP基因插在R基因和终止子T1之间
B.基因插在R基因和终止子T1之间
C.GFP基因插在启动子P2和终止子T2
D.lacZ基因插在启动子P2和终止子T2之间
三氯生是一种抑苗物质,可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。2021年某科研团队通过先筛选出一种对三氯生抵抗性较强的重组质粒,再将可以受温度调控 的基因插入该质粒上,构建了温度调控表达质粒。
   
(1)图1中,步骤1需要的工具酶是______________;步骤Ⅱ常用的方法是用____________处理使细菌成为感受态细胞;为达到步骤Ⅲ预期的筛选目的,所用物质X最可能为___________________
(2)已知fabV基因(-A和-B代表从不同苗中获得)可以使大肠杆菌抵抗三氯生。在图中,fabV-A基因和 fabV-B基因是_____________(目的/标记)基因。
(3)利用从细菌中提取的DNA通过PCR技术获取fabV-A基因时,需要的特定酶是________。该酶只能从引物的________端延伸DNA链,而不能从头开始合成DNA,因此需要先根据_____设计两种特异性引物序列。
(4)为获得一种增强大肠杆菌对三氯生的抵抗作用效果较好的重组质粒,将含有不同质粒的大肠杆菌分别接种到相应培养基中。培养一段时间后,结果如图2,则适宜选作构建温度调控表达质粒的是_________

   
(5)科学家对上述选出质粒进行改造,获得了图3所示质粒。其中P1和P2是启动子,可以启动转录;C基因在低温下会抑制P1;R基因在高温下会抑制P2;T1和T2是终止子,可以终止转录。如果将lacZ基因和GFP基因插入图质粒中,使得最后表现为高温下只表达GFP蛋白,而低温下只表达lacZ蛋白。则以下说法正确的有              
A.GFP基因插在R基因和终止子T1之间
B.lacZ基因插在R基因和终止子T1之间
C.GFP基因插在启动子P2和终止子T2之间
D.lacZ基因插在启动子P2和终止子T2之间
三氯生是一种广谱抑菌物质,可用于基因工程中筛选含目的基因的受体菌。某科研团队通过先筛选出一种对三氯生抗性较强的重组质粒(如图1),再将可以受温度调控的基因插入该质粒上,构建了温度调控表达质粒。请回答下列问题:

(1)利用从细菌中提取的DNA通过PCR技术获取fabV­A基因(或fabV­B基因)时,至少需经过________次扩增可获得8个双链等长的目的基因。实验操作时,微量离心管中需加入的物质有:模板、引物、原料、________________。下图2为PCR产物的电泳结果,操作较理想的泳道有________条。

(2)图1中,步骤Ⅰ需要的工具酶是________________;步骤Ⅱ常用的方法是用Ca2+处理使细菌成为________________;为达到步骤Ⅲ预期的筛选目的,所用物质X最可能为________
(3)为获得一种增强大肠杆菌对三氯生的抵抗作用效果较好的重组质粒,将含有不同质粒的大肠杆菌分别接种到相应培养基中。培养一段时间后,结果如图3,则适宜选作构建温度调控表达质粒的是________

(4)科研工作者对上述选出的质粒进行改造,获得了图4所示质粒。其中S1和S2是启动子,P1和P2是终止子。H基因在高温下会抑制S1,L基因在低温下会抑制S2
① 如果将lacZ基因和GFP(绿色荧光蛋白)基因插入图4质粒中,且使得低温下只表达GFP基因,高温下只表达lacZ基因,则lacZ基因插在________之间,而GFP基因的插入位置及注意点是________________
② 若以大肠杆菌为受体细胞,筛选上述①中插入GFP基因成功的受体细胞的依据是:大肠杆菌能在含________的培养基中生长,且__________________

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