组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，主要由血管内皮细胞合成、分泌、不断释放入血液，广泛存在于机体的各种组织内，可在转tPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

(1)在构建含有htPA基因的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是限制酶，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的__________断开。构建重组质粒时，通常使用两种限制酶切割，而不用一种限制酶切割目的是：__________。
(2)构建htPA基因表达载体，表达载体上除了htPA基因片段外，在htPA基因上游还必须拥有的DNA片段是__________，其作用是__________。
(3)要获得转基因羊，还需要将成功表达hLF的乳腺上皮细胞的细胞核移植到羊的__________中，再借助早期胚胎培养和胚胎移植技术孕育出羊羔。胚胎移植程序中要对供、受体母畜进行同期发情处理，目的是__________。
(4)若用分子水平方法判断获得的转基因羊中htPA基因是否成功表达，可检测是否含__________。