如图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物1—4在含有目的基因的DNA上的结合位置如甲图所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindDI在质-组卷网

单选题-单选适中0.65 引用5 组卷302

如图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物1—4在含有目的基因的DNA上的结合位置如甲图所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindDI在质粒上的识别位点如乙图所示。以下说法中错误的是（　　）

A．PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物30个

B．若已经合成了甲图所示4种引物，应选择引物2和3扩增目的基因

C．过程①中应使用限制酶BamHI切割质粒

D．对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，以防其污染环境

20-21高二下·山东济宁·期中

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知识点：目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定答案解析【答案】很抱歉，登录后才可免费查看答案和解析！

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图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物1～4在含有目的基因的DNA上的结合位置如图甲所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindⅢ在质粒上的识别位点如图乙所示。下列说法正确的是（）

A．过程①中应使用限制酶HimdⅢ切割质粒

B．应选择引物2和3扩增目的基因

C．过程②可用Ca²⁺处理来促进大肠杆菌的转化

D．若将该基因片段扩增6次，则消耗128个引物分子

下图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物1～4在含有目的基因的DNA上的结合位置如图甲所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindⅢ在质粒上的识别位点如图乙所示。下列说法正确的是（）

A．过程①中应使用限制酶HimdⅢ切割质粒

B．应选择引物2和3扩增目的基因

C．若将该基因片段扩增6次，则消耗126个引物分子

D．在氨苄青霉素培养基上生长的大肠杆菌就是此过程制备的工程菌

研究人员将人胰岛素基因转入大肠杆菌培育出能生产人胰岛素的工程菌，该过程所用的质粒与含人胰岛素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。
BamHI识别的碱基序列为G↓GATCC；Bcl I识别的碱基序列为T↓GATCA；Sau3A I识别的碱基序列为↓GATC；Hind III识别的碱基序列为A↓AGCTT。请回答下列问题：

(1)生产该大肠杆菌，需要获取目的基因，研究人员常从人______________细胞中获取mRNA，通过______________过程得到cDNA，然后用______________技术对cDNA进行扩增。
(2)用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时，应该选择限制酶______________切割质粒，选择限制酶______________（只选择一种）切割目的基因，用该方法切割目的基因、质粒后______________（填“能”或“不能”）防止目的基因的自身环化或与质粒的倒序连接。
(3)构建基因表达载体时，若要通过PCR扩增的方法，检测目的基因是否插入质粒中，应该选择图中的______________（填“甲乙”“甲丙”或“丙丁”）处碱基序列设计引物，若______________，说明成功将目的基因插入质粒。

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