单选题-单选 较易0.85 引用1 组卷75
基因和表达载体相连时既可以正向连接也可以反向连接。下图甲、乙分别表示某质粒、含目的基因和酶切位点的DNA片段,构建基因表达载体时应用酶B和酶C进行切割,不应用酶A切割运载体和DNA片段,其原因不包括( )
A.防止目的基因和运载体发生反向连接 | B.保证构建的重组质粒中含有标记基因 |
C.防止目的基因或运载体重新自身环化 | D.保证构建的重组质粒中含有启动子 |
19-20高二下·河北邢台·开学考试
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含氨苄青霉素抗性基因(AmpR)的质粒、含有目的基因的DNA片段及相关限制酶酶切位点如图所示。在构建基因表达载体(重组质粒),并转化到受体菌中的实践中,某同学选用EcoRI和MfeI分别对质粒和含目的基因的DNA片段进行双酶切。下列对这种操作的优点的叙述,正确的是( )
A.可以避免质粒或者目的基因自身环化 |
B.可以避免目的基因与质粒反向连接 |
C.可以避免一个质粒中连续接入多个目的基因 |
D.可以避免受体菌的EcoRI和MfeI将重组质粒中的目的基因切割下来 |
科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。该过程所用的质粒A与含生长激素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示,其中切割位点相同的酶不重复标注。限制性核酸内切酶BamHI、BclI、Sau3AI、HindⅢ,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT,下列相关叙述错误的是( )
A.图1质粒中没有标注出来的基本结构是复制原点 |
B.图2中的DNA用Sau3AI完全酶切后,反应管中有4种DNA片段 |
C.BamHI酶切的DNA末端与Sau3AI酶切的DNA末端连接,连接部位用BamHI一定能切开 |
D.在构建基因表达载体时,为防止目的基因的反向连接,应选用限制酶HindⅢ和BamHI切割质粒,选用限制酶HindⅢ和BclI切割含目的基因的DNA片段 |
某实验小组利用下图所示质粒和目的基因来构建基因表达载体,将目的基因导入大肠杆菌细胞并表达。下列叙述正确的是( )
A.图中的质粒用酶B切割后会产生4个游离的磷酸基团 |
B.在构建重组质粒时可用酶A和酶C切割质粒和目的基因 |
C.成功导入目的基因的大肠杆菌可在含四环素的培养基中生长 |
D.若用酶B和酶C切割可以避免质粒和目的基因反向连接 |
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